CARACTARIZAÇÃO DE EXOPOLISSACARÍDEOS E LIPOPOLISSACARÍDEOS DA BACTÉRIA ENDOFÍTICA FIXADORA DE NITROGÊNIO BURKHOLDERIA KURURIENSIS KP23

Daniel Passos (UFRJ); Letícia Hallack (UFRJ); José Osvaldo Previato (UFRJ); Lucia Previato (UFRJ)

Burkholderia kururiensis é uma bactéria diazotrófica isolada em 2001, de um ambiente aqüífero poluído no Japão. No ano seguinte foi descrita a capacidade da mesma em fixar nitrogênio atmosférico caracterizando-a como uma diazotrófica. Em nosso laboratório foi avaliada sua capacidade em colonizar plantas de arroz promovendo aumento no crescimento e na produtividade do vegetal, em uma relação tipicamente endofitica. Embora o mecanismo pelo qual as bactérias endofíticas invadem a planta hospedeira não seja conhecido, glicomoléculas como exopolissacarídeo (EPS) e lipopolissacarídeo (LPS) podem ser necessárias para uma efetiva interação planta-bactéria, como descrito na simbiose Rhizobium/leguminosa. Os glicoconjugados de superfície desta bactéria são objetos de pesquisa em nosso laboratório e neste trabalho, estamos interessados na caracterização estrutural do LPS e do EPS de B. kururiensis cepa KP23. Para a caracterização dos polissacarídeos, a bactéria foi crescida em meio Manitol-Glutamato. Após centrifugação o LPS foi extraído com fenol-água 40% a 65°C das células desprovidas de cápsula. O EPS foi precipitado do sobrenadante com 3 volumes de etanol. A composição monossacarídica foi determinada por CGL-EM. A fração glicídica do LPS de B. kururiensis é constituída predominantemente de unidades de ramnose. O EPS bruto de B. kururiensis apresentou uma mistura de 2 EPSs, que são constituídos de ramnose, glucose e ácido glucurônico, porém com variações na relação molar. Estudos posteriores demonstraram que as unidades monossacarídicas de ramnose no LPS possuem configuração absoluta da série D e as unidades de ramnose do EPS possuem configuração absoluta da série L. De acordo com estes resultados, demonstramos que a espécie sintetiza, apenas, exopolissacarídeos ácidos. A presença de diferentes EPSs produzidos pela mesma espécie de Burkholderia, foi descrita por outros pesquisadores e parece ser uma característica deste gênero.