25º Congresso Brasileiro de Microbiologia
ResumoID:2247-1


Área: Micobacteriologa ( Divisão C )

INVESTIGAÇÃO MOLECULAR DO MYCOBCTERIUM TUBERCULOSIS EM UM MUNICÍPIO PRIORITÁRIO PARA A TUBERCULOSE DO NOROESTE PAULISTA.

Adriana Antônia Cruz Furini (FAMERP); Heloisa Silveira Paro Pedro (IAL); Luciana Moran Conceição (FAMERP); Marcell Sant'anna Camacho de Oliveira (FAMERP); Jean Francisco Rodrigues (FAMERP); Ricardo Luiz Dantas Machado (FAMERP); Lilian Maria Lapa Montenegro (CPqAM/Fio Cruz); Haiana Charifker Schindler (CPqAM/Fio Cruz); Célia Franco (FUNFARME); Andrea Regina Baptista Rossit (FAMERP)

Resumo

INTRODUÇÃO

O diagnóstico da tuberculose paucibacilar constitui desafio, em especial para pacientes soropositivos para o HIV/doentes de AIDS, transplantados, portadores de doenças reumáticas e crianças. O objetivo desse trabalho foi o de comparar o método fenotípico e molecular de detecção do Mycobacterium tuberculosis (MT) em pacientes diferencialmente susceptíveis.

MATERIAIS E MÉTODOS

Foram realizadas baciloscopia, cultura automatizada em sistema BacT/ALERT, e amplificação por Nested-PCR do elemento de inserção IS6110 para investigação de MT em 60 amostras pulmonares (n=16) e extrapulmonares (n=44) de 42 pacientes. Dessas, 3 eram de crianças, 42 de HIV/doentes, 7 de insuficientes renais/transplantados renais e 8 de doentes reumáticos sob terapia imunossupressora. Para estatística foram empregados os Testes de McNemar e Kappa (BioEstat v. 3.0) com nível de significância de 5%.

DISCUSSÃO DOS RESULTADOS

Após cultura e Nested-PCR, quatro amostras (escarro) forneceram resultado positivo em ambas metodologias (6,7%; 2 pacientes) com índice de positividade de 25% (15 pacientes) pelo método molecular. Todas as oito amostras de sangue positivas pela Nested-PCR (n=8 pacientes) forneceram resultados negativos em hemocultura. Tanto a baciloscopia quanto a cultura foram negativos em amostras positivas pela PCR de escarro (1), líquor (3) e biópsia pleural (1) obtidas de cinco indivíduos soropositivos para o HIV-1. Houve discordância quando comparados os resultados da cultura versus Nested-PCR (Teste de Kappa; p = 0,0030 e Teste de McNemar; p = 0,0026) com maior positividade pelo método molecular, independente do espécime clínico ou grupo de pacientes. A carga microbiana insuficiente pode explicar esse achado, pois a maioria dos pacientes aqui incluídos são paucibacilares. Outra possibilidade é a da terapêutica antimicobacteriana dificultar crescimento em cultura ou, por outro lado, a contaminação em laboratório favorecer positividade via análise molecular. No entanto, controles negativos e positivos foram aqui utilizados, conforme recomendado.

CONCLUSÃO

Apesar do aumento na capacidade de detecção de MT via método molecular, anteriormente referido, tal ferramenta é incapaz de determinar a viabilidade de MT. Desse modo, a análise de todas as ferramentas diagnósticas associadas à interpretação clínica, permite a definição da tuberculose doença.

Apoio Financeiro: CNPq 576297/2008-9

 


Palavras-chave:  Diagnóstico molecular, Mycobacterium tuberculosis, PCR, Tuberculose