Área: Ecologia Microbiana ( Divisão I ) CARACTERIZAçãO MORFOLóGICA E GENéTICA DE ISOLADOS DE CIANOBACTéRIAS DO ARQUIPéLAGO SHETLANDS DO SUL, ANTáRTICA
Diego Bonaldo Genuã¡rio (CENA/USP); Danillo Oliveira de Alvarenga (CENA/USP); Isabela Moraes Ascencio (CENA/USP); Janaina Rigonato (CENA/USP); Marli Fã¡tima Fiore (CENA/USP)
ResumoO ambiente antártico apresenta condições climáticas extremas, tais como temperaturas negativas, ventos fortes e baixa umidade em função do congelamento, tornando essa região inóspita para a maioria das formas de vida. No entanto, as cianobactérias têm sido encontradas colonizando ambientes polares. A versatilidade adaptativa das cianobactérias pode ser atribuÃda a modificações morfo-fisiológicas, a predominância da forma autotrófica oxigênica de nutrição e sua habilidade de fixar nitrogênio atmosférico. O presente trabalho visou isolar e caracterizar morfológica e molecularmente linhagens de cianobactérias colonizadoras do Arquipélago Shetlands do Sul na Antártica, um ambiente ainda sem registro da diversidade desses microrganismos. Amostras de solo, rocha, manto microbiano, biofilme, lÃquen e de água proveniente de poças e riachos formados pelo derretimento das geleiras foram coletadas em sete pontos distribuÃdos em toda área compreendida pela Baia do Almirantado, Ilha Rei George e Ilha Deception. O isolamento foi conduzido em quatro tipos de meios lÃquidos e sólidos especÃficos de crescimento de cianobactérias (BG-11, BG-110, 3 e 3NP). Após a verificação do crescimento, as linhagens foram estriadas continuamente em meio sólido para sua purificação. Observações ao microscópio óptico foram realizadas visando à identificação morfológica das linhagens e a confirmação da condição monoespecÃfica das culturas. Todos os isolados purificados foram inoculados nos meios lÃquidos e após crescimento, as células foram concentradas e utilizadas para extração de DNA genômico. A amplificação por PCR do gene RNAr 16S foi feita usando os iniciadores 27F1 e 1494Rc. Em seguida, realizaram-se os procedimentos para clonagem e sequenciamento dos produtos de PCR. Os resultados de isolamento revelatam a predominância dos ordens Oscillatoriales e Nostocales sendo os gêneros mais abundantes: Leptolyngbya, Phormidium, Geitlerinema, Limnothrix, Lyngbya, Pseudanabaena, Planktolyngbya, Nostoc, Anabaena e Nodularia. As sequências do gene RNAr 16S obtidas tiveram suas relações filogenéticas investigadas comparando-as com outras sequências depositadas no banco de dados do GenBank. As sequências geradas neste estudo são inéditas, sendo este o primeiro relato de caracterização molecular de cianobactérias na região do Arquipélago Shetlands do Sul na Antártica.
Apoio Financeiro: CNPq e FAPESP
Palavras-chave: Ambiente Polar, Cultivo, PCR, RNAr 16S, Sequenciamento |