ANáLISE FILOGENéTICA DE CIANOBACTéRIAS ISOLADAS DE MANGUEZAIS E AVALIAçãO DA FIXAçãO BIOLóGICA DE NITROGêNIO

Diego Bonaldo Genuã¡rio (CENA/USP); Marli Fã¡tima Fiore (CENA/USP)

Manguezal é um ecossistema costeiro de transição entre o ambiente terrestre e aquático com alta produtividade primária, no qual a comunidade microbiana desempenha papel essencial na ciclagem de nutrientes. Muitas espécies de cianobactérias são capazes de realizar a fixação biológica do nitrogênio (FBN) contribuindo para a entrada de formas assimiláveis de N nos ecossistemas de manguezal, os quais são ambientes deficientes deste elemento. O presente trabalho visou caracterizar geneticamente as linhagens de cianobactérias isoladas de manguezais do Estado de São Paulo e investigar seu potencial de FBN. As linhagens de cianobactérias foram isoladas de dois ecossistemas de manguezais distintos, ou seja, Bertioga (impactado pelo derramamento de petróleo na década de 90) e Ilha do Cardoso (preservado). Após a extração de DNA genômico, as amostras foram amplificadas via PCR e nested PCR, utilizando oligonucleotídeos iniciadores específicos para os genes rpoC1 e nifH, respectivamente. Em seguida, realizou os procedimentos para a clonagem e sequenciamento dos produtos da PCR. A atividade da nitrogenase redutase foi avaliada pelo método da atividade de redução de acetileno (ARA), no qual as linhagens foram incubadas por duas horas em atmosfera modificada, contendo 10% de acetileno. Alíquotas do etileno convertido foram retiradas e analisadas em cromatógrafo a gás. Fragmentos do gene rpoC1 e nifH foram sequenciados para 21 e 10 linhagens, respectivamente, e as relações filogenéticas de cada gene foram investigadas por meio da construção de árvore filogenética. A presença do gene nifH foi verificada em linhagens pertencentes as ordens Chroococcales, Oscillatoriales e Nostocales. Os resultados de ARA demostram que a capacidade para a redução do N2 atmosférico não está restrita às formas heterocitadas (Nostocales) e confirmam que as formas não heterocitadas desenvolvem estratégias alternativas para a FBN evitando os efeitos deletérios do oxigênio.

Apoio Financeiro: CNPq e FAPESP