RESERVA PROTÉICA NO GÊNERO BEIJERINCKIA SP ISOLADA DA RIZOSFERA DE CANA-DE-AÇÚCAR

Tânia Regina dos Santos (ICB); Heloiza Ramos Barbosa (ICB); José Gregório Cabrera Gomez (ICB); Iris Takako Moribe (ICB)

O gênero Beijerinckia sp é encontrado em abundância em solos tropicais lateríticos. É adaptada a ambientes hostis (variações de pH e íons tóxicos). Apresentam a capacidade de fixar N₂ pela presença da enzima nitrogenase sob condições estressantes. Pesquisas in vitro evidenciaram que a Beijerinckia derxii podem liberar ao meio substâncias nitrogenadas como aminoácidos, poliaminas e fitormônios, tanto em presença como em ausência de N-combinado. Esta espécie mostrou-se capaz de concentrar proteína na forma de grânulos citoplasmáticos, similares à cianoficina, produzida por cianobactérias. Esta é uma proteína não ribossômica, que apresenta perspectivas de interesse industrial. Este projeto tem por objetivo avançar no conhecimento sobre reserva protéica de cinco isolados de Beijerinckia, provenientes da rizosfera de cana-de-açúcar (Saccharum sp), associada à fixação biológica de nitrogênio, bem como pesquisar a presença do gene cphA que codifica para a síntese da enzima cianoficina sintetase, detectado em cianobactéria. Os resultados obtidos até o presente mostraram que curvas de crescimento dos cinco isolados e de Beijerinckia derxii, utilizada para comparação apresentaram perfis semelhantes. Após um período em que as culturas foram incubadas para o armazenamento da reserva, procedeu-se às dosagens protéicas pelo método de Bradford; a determinação de Unidades Formadoras de Colônias e a verificação da atividade enzimática. Resultados prévios mostraram nestes novos isolados de Beijerinckia sp um aumento na concentração de proteína celular à medida em que a população se apresentava com um número constante,  indicando que esse incremento era devido a um aumento de algum tipo de reserva. Concomitantemente, foi detectada atividade da nitrogenase pelo método de redução de acetileno. A comparação dos dados mostrou que três dos isolados (ICBR 55, ICBR 88 e ICBR 177) apresentaram maior elevação no teor de proteína. A ocorrência de fixação de nitrogênio durante a fase estacionária sugere que o destino do nitrogênio fixado tenha sido os grânulos de armazenamento. Posteriormente os grânulos serão purificados e analisados para a determinação da composição em aminoácidos.