CARACTERIZAÇÃO MORFOLÓGICA E GENÉTICA DE ISOLADOS DE CIANOBACTÉRIAS DA FILOSFERA DE AVICENNIA SCHAUERIANA

Danillo Oliveira de Alvarenga (CENA/USP); Janaina Rigonato (CENA/USP); Marli Fátima Fiore (CENA/USP)

Cianobactérias são microrganismos fotoautotróficos oxigênicos e algumas espécies possuem a capacidade de fixar nitrogênio atmosférico. A associação entre cianobactérias e plantas é conhecida e pode ser importante para a sobrevivência do hospedeiro, especialmente em ecossistemas extremos com deficiência de nitrogênio. Estudos recentes estimaram que o ambiente extremo formado pela superfície de folhas de árvores, a filosfera, abriga milhões de espécies bacterianas. Deste modo, este estudo teve como objetivo isolar linhagens de cianobactérias presentes na superfície das folhas secretoras de sal da planta de manguezal Avicennia schaueriana e caracterizar morfológica e molecularmente os isolados. Para isso, folhas de A. schaueriana foram coletadas em um ponto próximo ao Rio Iriri, em Bertioga, Santos-SP, uma área com histórico de contaminação por petróleo. O isolamento das cianobactérias foi realizado usando quatro meios de cultura e dois métodos: a) esfregaço das folhas nos meios sólidos em placas de Petri; e b) submersão das folhas nos meios líquidos em Erlenmeyers. Após a verificação do crescimento, as linhagens foram continuamente estriadas em meio sólido para sua purificação. Os caracteres morfológicos das culturas puras foram analisados por meio de microscopia óptica. Todos os isolados purificados foram inoculados em meios líquidos e, após crescimento, tiveram suas células concentradas e utilizadas para extração de DNA genômico. A amplificação por PCR do gene de RNAr 16S foi realizada usando os iniciadores 27F1 e 1494Rc. As sequências do gene de RNAr 16S obtidas após o sequenciamento foram usadas na construção de árvore filogenética. Trinta morfotipos foram isolados em meio líquido e apenas quatro em meio sólido, identificados como pertencentes a três ordens diferentes (5 Chroococcales, 15 Oscillatoriales e 14 Nostocales). As análises morfológicas e filogenéticas de dois isolados não apresentaram características de gêneros já descritos, representando, portanto, novos táxons, pertencentes às famílias Xenococcaceae e Pseudanabaenaceae. Este é o primeiro relato de isolamento de cianobactérias da superfície de folhas de A. schaueriana. A alta abundância de linhagens fixadoras de N₂ encontrada indica que elas possivelmente são fonte de nitrogênio para a planta.

Apoio financeiro: FAPESP