ANÁLISE COMPARATIVA DO PROTEOMA DE SUPERFÍCIE DE CEPAS DE MYCOBACTERIUM BOVIS BCG.

Talita Pagani (FIOCRUZ - IOC); Márcia Berrêdo Pinho Moreira (FIOCRUZ - IOC); Melissa Pontes Pereira (FIOCRUZ - IOC); Dário Elluan Kalume (FIOCRUZ - IOC); Luiz Roberto Castello-branco (FAP); Wim Maurits Degrave (FIOCRUZ - IOC); Leila Mendonça Lima (FIOCRUZ - IOC)

A tuberculose, cujo agente etiológico é o Mycobacterium tuberculosis, constitui um sério problema de saúde pública mundial. Esta doença representa uma das causas mais freqüentes de morte por infecção bacteriana, ameaçando um terço da população mundial e causando três milhões de mortes anualmente. A vacina BCG é o único método profilático disponível contra a tuberculose, entretanto, sua eficácia mostra-se muito variável dependendo do ensaio clínico, variando de 0 a 80%. O melhor estudo desta vacina faz-se, portanto, extremamente necessário. Neste contexto, as proteínas associadas à superfície desempenham um papel importante na modulação da resposta imune do hospedeiro, principalmente na interface bactéria-hospedeiro e, precisam ser melhor elucidadas. Estudos mostram que estas proteínas estão envolvidas na comunicação celular, resposta química ao ambiente e processo patogênico mediante mecanismos de mobilidade, colonização e aderência à célula hospedeira. Este trabalho relata a definição deste perfil proteômico de superfície do M. bovis BCG Moreau, o que permite o maior conhecimento desta cepa vacinal brasileira. Primeiramente fez-se o controle de qualidade das amostras a serem analisadas através de eletroforese uni-dimensional em géis SDS-PAGE 12% de 7cm corados por nitrato de prata. Em seguida, através da eletroforese 2-D em géis SDS-PAGE 12% e 14% de 17cm pH 4-7 corados com coomassie coloidal, descrevemos os perfis proteômicos da fração de proteínas de superfície das cepas de M. bovis BCG Moreau e Pasteur (cepa referência), cultivadas no meio de produção da vacina intradérmica (meio Sauton), identificando 76 proteínas por espectrometria de massas. A análise comparativa permitiu a identificação de proteínas diferencialmente expressas entre as cepas Moreau e Pasteur, evidenciando exemplo de possível ganho funcional através de perda de informação genômica. As proteínas diferenciais identificadas poderão ser exploradas como marcadores para melhor controle de qualidade de produção da vacina BCG Moreau, e abrem novas perspectivas para a compreensão dos mecanismos moleculares envolvidos na indução da resposta imune protetora pela vacina brasileira. Com isso, estes estudos podem contribuir, para o desenvolvimento de uma vacina mais eficiente contra a tuberculose.