REVACINAÇÃO COM BCG: MAPEAMENTO PROTEÔMICO DA RESPOSTA HUMORAL

Melissa Pontes Pereira (IOC/FIOCRUZ); Márcia Berrêdo Pinho Moreira (IOC/FIOCRUZ); Mariana Caldas Waghabi (IOC/FIOCRUZ); Theolis Barbosa (CpqGM/FIOCRUZ); Leila Mendonça–lima (IOC/FIOCRUZ)

A tuberculose (TB) causada pelo Mycobacterium tuberculosis, constitui uma das principais causas de morte por doença infecciosa no mundo. A principal estratégia para seu controle é a vacinação. Atualmente, a única vacina disponível é o BCG (Bacilo de Calmette-Guèrin) que, embora utilizado mundialmente, apresenta diversas limitações. Com relação à resposta imunoprotetora na tuberculose, a imunidade celular desempenha papel fundamental, semelhante ao observado para outros patógenos intracelulares . Neste contexto, o INFg vem sendo descrito como uma importante citocina, e atualmente é empregado como um biomarcador de proteção. Neste trabalho avaliamos a resposta humoral de indivíduos saudáveis, PPD negativos, revacinados com M. bovis BCG Moreau (cepa vacinal brasileira), e classificados em dois grupos quanto à produção de INFg (alto e baixo produtores), frente a antígenos protéicos extracelulares da cepa vacinal BCG Moreau. As ferramentas metodológicas utilizadas neste estudo envolveram: eletroforese bi-dimensional (2DE), que possibilita a confecção de mapas protéicos de alta resolução, e western blotting, que propicia o reconhecimento das proteínas mapeadas por anticorpos presentes no soro dos indivíduos revacinados e controles. Nossos resultados demonstraram um padrão diferencial de reconhecimento antigênico com clara correlação com o perfil de produção de INF g - alguns antígenos foram reconhecidos exclusivamente pelo soro de indivíduos classificados como alto produtores de INF g enquanto outros somente pelos indivíduos do grupo de baixo produtores desta citocina. Estes spots protéicos diferenciais foram identificados por espectrometria de massas, e estão sendo clonados e expressos sob forma recombinante em Escherichia coli para avaliação mais detalhade de suas propriedades imunológicas, assim como sua aplicabilidade como marcadores sorológicos alternativos ao teste de produção de INFg.