DETECÇÃO DO OPERON SUBAB, QUE CODIFICA A CITOTOXINA SUBTILASE, NOS DIFERENTES PATOTIPOS DE ESCHERICHIA COLI

Kinue Irino (IAL); Mônica A.m Vieira (EPM/ UNIFESP); Tânia A. T. Gomes (EPM/ UNIFESP); Zita V.f. Naves (IAL); Beatriz E.c. Guth (EPM/ UNIFESP); Murilo G. Oliveira (UFJF); Cláudio D. Timm (UFPEL); Caroline P. Pigatto (UFP); Sonia M.s.s. Farah (LACEN - PR); Tânia M.i. Vaz (IAL)

A citotoxina subtilase (SubAB) foi identificada pela primeira vez em uma cepa virulenta de Escherichia coli produtora da toxina Shiga pertencente ao sorotipos O113:H21, e homólogos dos genes subAB já foram detectados  também em outros sorotipos de STEC. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença do operon subAB nos diferentes patotipos de E.coli. Foram estudadas 1.237 cepas de E.coli  de origem humana, isoladas em São Paulo, pertencentes à EPEC (402), ETEC (264), EIEC (266), EAEC (100), ExPEC (205) e 1.018 cepas de E.coli "não patogênicas" (não pertencentes às categorias já descritas). As 1.348 cepas de E.coli de origem não humana correspondiam a 1.198 cepas de STEC (109 diferentes sorotipos e cepas não tipáveis) isoladas de bovinos, búfalos e caprinos, e 150 cepas de E.coli não STEC isoladas destes  animais. Um total de 3.603 cepas de E.coli foram submetidas à hibridização de colonia com sonda de DNA e a confirmação da presença do operon subAB foi realizada pela PCR. Foi verificada a associação deste operon com a presença de outros genes,previamente determinados, eae, ehxA, stx₁, stx₂, iha e saa. O operon subAB foi detectado exclusivamente entre cepas STEC e correspondeu a 25.5% (306/1.198) da coleção STEC. A mais alta prevalência de subAB foi observada entre cepas STEC isoladas do gado de leite (44.2%), seguido de búfalos (27.1%) , e gado de corte (23.8%). Somente 3% de cepas STEC isoladas de caprinos carreavam subAB. Um total de 306 cepas STEC carreadoras de subAB foi detectada em 21 diferentes sorotipos: O39:H49, O44:H25,O59:H8,O74:H28(H-), O77:H18, O79:H-, O79:H14, O79:H28, O96:H19,O96:H21,O105:H18, O113:H21,O116:H21,O141:H49,O153:H25,O163:H19(H-),O174:H28, O176:H18, O178:H18,O178:H19 e O179:H8. Observou-se que todas as cepas STEC carreadoras de subAB eram desprovidas do gene eae e 59.8% estavam associadas com cepas portadoras do gene stx₂, 39.9% eram stx₁ + stx₂ , e somente 0.3% carreavam stx₁. Todas as cepas foram positivas para ehxA e 98.4% eram iha e saa positivas. Concluímos que entre as cepas de E.coli pertencentes a diferentes patotipos, o operon subAB está presente somente entre as cepas STEC e associado com sorotipos eae negativos. A forte associação entre os genes subAB, ehxA e stx₂ ressalta o potencial risco que estas cepas STEC podem representar para a sáude pública.