EFEITO DE INIBIDORES DE METALOPEPTIDASES SOBRE ASPECTOS MÚLTIPLOS DA BIOQUÍMICA E BIOLOGIA CELULAR DO FUNGO PSEUDALLESCHERIA BOYDII

Bianca Alcântara da Silva (UFRJ); Viviane Lione (UFRJ); Érika Abi-chacra (UFRJ); Maria Teresa Villela Romanos (UFRJ); Malachy Mccann (NUIM); Eliana Barreto-bergter (UFRJ); André Luis Sousa dos Santos (UFRJ)

Pseudallescheria boydii (anamorfo Scedosporium apiospermum) é um fungo amplamente distribuído na natureza. As patologias ocasionadas por esse microrganismo podem ser desde lesões subcutâneas (micetoma micótico) até infecções disseminadas. O tratamento da pseudallescheriose é difícil, uma vez que esse fungo possuiu resistência intrínseca a maioria dos antifúngicos utilizados na clínica. Além disso, pouco se sabe sobre os fatores de virulência expressos por esse patógeno. Recentemente, nosso grupo caracterizou duas metalopeptidases acídicas (28 e 35 kDa) secretadas para o meio extracelular pelas formas micelianas de P. boydii. O estudo de peptidases tem sido proposto como alvo à pesquisa de novas drogas antimicrobianas, uma vez que muitos inibidores proteolíticos têm surgido como potenciais drogas de uso na terapêutica de inúmeros processos patológicos. No presente trabalho, testamos o efeito de diferentes inibidores de metalopeptidases 1,10-fenantrolina, fendio, Cu²⁺-fendio e Ag²⁺-fendio sobre aspectos múltiplos da biologia celular e bioquímica de P. boydii. Esses compostos foram capazes de inibir as peptidases secretadas pelo fungo além de inibir a viabilidade celular de conídios e micélio de P. boydii. Os compostos também foram capazes de inibir o processo de diferenciação celular, de forma dose dependente, bem como o processo de interação celular do fungo com macrófagos e células epiteliais pulmonares. Através de citometria de fluxo, observou-se que o composto derivado de cobre inibiu a expressão de glicoconjugados ricos em manose/glucose na superfície dos conídios, dentre estes a adesina fúngica peptideoramnomanana. Observamos ainda que os inibidores reduziram a expressão de moléculas ligadoras de fibronectina e esterol de membrana. Através de microscopia eletrônica de varredura observamos que os inibidores induziram grandes alterações na ultraestrutura da célula fúngica. Coletivamente, nossos resultados demonstraram que os inibidores de metalopeptidases foram capazes de bloquear processos biológicos essenciais em P. boydii, tais como: crescimento, diferenciação e interação com células do hospedeiro.
Suporte Financeiro: CAPES, CNPq & FAPERJ.