CARACTERIZAÇÃO DA COMUNIDADE DE ARQUÉIAS PRESENTE NA ÁGUA DE PRODUÇÃO DE PETRÓLEO ATRAVÉS DA CONSTRUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DO GENE RNA RIBOSSOMAL 16S.

Francine Amaral Piubeli (UNICAMP); Lúcia Regina Durrant (UNICAMP); Fabiana Fantinatti Garboggini (UNICAMP)

A elevada participação de derivados de petróleo na matriz energética mundial, resulta no acúmulo destes no meio ambiente. Durante a produção de petróleo em sistemas que operam com recuperação secundária, é comum a co-produção de parte da água empregada no processo de injeção. A consequência desse fato é a geração de grandes volumes de água a serem descartados no mar. Esta água, denominada água de produção, geralmente, contém altos teores de sais e uma mistura complexa de compostos orgânicos e inorgânicos. Devido a presença de altas concentrações de sais nestes efluentes, variando de 7% a 10%, há uma maior propenção para o desenvolvimento de microrganimos halofílicos. Tais microrganimos podem estar envolvidos no mecânismo de degradação primário podendo assim serem empregados na sua biorremediação. Metodologias moleculares têm sido adaptadas para superarem as limitações impostas pela abordagem clássica de estudo de populações microbianas e, conseqüentemente, reduzirem os erros associados a esta estratégia. A utilização de uma abordagem molecular permite uma visão representativa da extensão da diversidade bacteriana no ambiente, que supera em muito a diversidade conhecida de microrganismos cultivados em laboratório. Visando o conhecimento da diversidade de microrganismos presente na água de produção foi construída uma biblioteca do gene RNA ribossomal 16S para o domínio Archaea. O DNA genômico foi extraído diretamente da água de produção e utilizado com molde para amplificação do gene RNA ribossomal 16S através da técnica de PCR. Os fragmentos de DNA correspondente ao gene RNA ribossomal 16S foram clonados em vetor plasmidial pGEM-T Easy Vector System (Promega) e transformados em E. coli. Foram obtidos 396 clones dos quais 96 foram seqüenciados até o momento. A comparação das seqüências da biblioteca de arquéias com as sequências do gene RNA ribossomal 16S presente nos bancos de dados GenBank e RDP revelaram a presença de microrganismos pertencentes a ordem Methanomicrobia, com destaque para os gêneros: Methanosaeta, Methanoplanus, Methanolobus, Methanocelleus e Methanogenium. Apesar de ainda serem resultados preliminares, é possível observar que estes microrganismos desempenham papel importante no metabolismo de fenol, componente abundante em amostras de petróleo.