25º Congresso Brasileiro de Microbiologia
ResumoID:1826-1


Área: Microbiologia Clinica ( Divisão A )

EFEITO ANTI-CANDIDA DO INIBIDOR SECRETADO DA ELASTASE LEUCOCITARIA (SLPI)

José Alexandre Curvelo (UFRJ); Maristela Portela (UFRJ); Daniela Alviano (UFRJ); Rosangela Soares (UFRJ)

Resumo

A alta prevalência de candidíase em pacientes imunocomprometidos tem estimulado pesquisas que buscam novas alternativas de tratamento e prevenção para esta infecção. O inibidor secretado da protease leucocitária (SLPI) é um peptídeo com importante atividade antimicrobiana e está presente em secreções mucosas como saliva, leite e sêmen. Esta característica antimicrobiana provavelmente reside na sua natureza catiônica que permite sua ligação à membrana plasmática do microrganismo com conseqüente desestabilização. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito antifúngico da SLPI sobre Candida albicans através da mensuração do crescimento, morfogênese e a presença de receptores de superficie.

Foram utilizadas duas cepas distintas de C. albicans. Uma cepa ATCC (24433) e uma cepa isolada clinicamente e resistente ao fluconazol (PRI). Após cultivo das células em meio líquido (Sabouraud dextrose) por 48 horas a 370C sob agitação, os ensaios de concentração mínima inibitória (MIC) foram relizados de acordo com o protocolo M-27A do CLSI. A atividade fungicida foi avaliada através da incubação 106 leveduras/ml na presença e ausência da SLPI por 3 horas em 370C e posterior contagem das unidades formadoras de colônia (UFC). A morfogênese foi avaliada pela formação de tubo germinativo induzida por soro fetal bovino contendo ou não 10 μM (IC50) de SLPI, e a viabilidade celular foi avaliada pela exclusão do azul de Tripan. Para a analise por citometria de fluxo, as celuals fizadas e bloqueadas foram incubadas sequencialmente com 2 μM de SLPI, IgG anti-SLPI e anticorpo secundário marcado com FITC.

Os valores referentes ao MIC de ambas as células foram semelhantes (19μM ATCC e 18 μM Pri). A atividade fungicida se mostrou dose dependente variando entre as cepas, com valores de 19μM (PRI) e 20 μM (ATCC). O ensaio de morfo-diferenciação das leveduras demonstrou uma inibição de 35% na presença de 10 μM de SLPI para ambas as leveduras. A análise por citometria de fluxo das leveduras após incubação na presença de 10 μM de SLPI revelou que 15% das células expressam receptor para essa proteína. De acordo com os resultados obtidos, a SLPI demonstrou significativa atividade anti-Candida e modulação do processo de morfogênese. Apoio financeiro: Capes; FAPERJ e CNPq


Palavras-chave:  Candida, antimicrobiano, SLPI, candidíase, saliva