GERAÇÃO DE CÉLULAS T DE MEMÓRIA E LINFÓCITOS T REGULADORES EM CAMUNDONGOS BALB/C VACINADOS COM VETOR PLASMIDIAL CONTENDO O INSERTO P10 DE PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS

Juliana de Amorim (USP); Adriana Magalhães Santos (USP); Julian Esteban Muñoz Henao (USP); Marcia Ribeiro Pinto da Silva (USP); Sandro Rogério de Almeida (USP); Luiz Rodolpho Travassos (UNIFESP); Carlos Pelleschi Taborda (USP)

O fungo Paracoccidioides brasiliensis é um fungo dimórfico patogênico e agente etiológico da paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica de caráter granulomatoso, considerada endêmica no Brasil e outros países da América Latina como Argentina, Venezuela e Colômbia, ocupando o décimo lugar dentre as doenças infecciosas crônicas que mais matam no Brasil. A busca por alternativas ao tratamento clássico da paracoccidioidomicose, o qual é longo, levou ao desenvolvimento de uma vacina de DNA contendo a sequência do peptídeo P10 de P. brasiliensis. Este peptídeo foi capaz de conferir proteção em modelo experimental uma vez que elicita uma resposta imune celular do tipo Th1, considerada protetora na infecção por P. brasiliensis. Levando-se em consideração que este peptídeo induz uma proliferação de células T, polarizando a resposta imune para o padrão Th1, tem-se a necessidade em verificar se a inflamação mais exacerbada provocada nestes animais também leva a um aumento na geração de células T reguladoras. Além disso, faz-se necessário determinar se a vacina contendo a sequência deste peptídeo é capaz de gerar células T de memória. O presente trabalho tem por objetivo avaliar a geração destas populações de células T em animais imunizados com o vetor contendo o inserto P10 de P. brasiliensis antes e após o desafio. Para tanto, células do baço destes animais foram submetidas a um ensaio de proliferação celular com estímulo de P10 por 144 horas e então imunofenotipadas por citometria de fluxo, utilizando os marcadores CD4, CD44, CD8, CD25 e Foxp3. Os primeiros resultados mostram que efetivamente há um aumento de células T com fenótipo de reguladoras e de memória nos camundongos imunizados com o vetor contendo o inserto, antes e após 60 e 120 dias do desafio. A identificação de citocinas revelou uma resposta celular mista com predomínio do padrão Th1, caracterizado pelo aumento de IFN-γ, TNF-α e IL-12.