AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE QUERATINOLÍTICA E PROTEOLÍTICA DE BASTONETE GRAM POSITIVO ISOLADO DE EXTRATO PIROLENHOSO

Sabrina Martins Lage Cedrola (UFRJ); Fabíola Pinto Lacerda (UFRJ); Edilma Paraguai de Souza Dias (UFRJ); Alane Beatriz Vermelho (UFRJ)

A indústria avícola possui importante papel na economia brasileira. Em 2008 foram produzidos aproximadamente 11 milhões de toneladas de frango o que gerou 772 mil toneladas de penas como principal resíduo. As penas são constituídas principalmente por queratina, proteína fibrosa e insolúvel, com alto teor de pontes dissulfeto entre os aminoácidos cisteína, o que confere a ela resistência a enzimas como pepsina, papaína e tripsina. Entretanto estas proteínas são degradadas por queratinases, enzimas de natureza indutível produzidas por algumas espécies de microrganismos. Neste trabalho foi utilizado um bastonete Gram positivo isolado de extrato pirolenhosos. Este resíduo é obtido através da condensação da fumaça proveniente da carbonização da madeira, durante a produção de carvão vegetal. O microrganismo foi crescido em meio extrato de levedura por 48 horas e as células foram centrifugadas e lavadas para serem inoculadas em meio contendo tampão fosfato pH7,0 e 1% de penas.  Após 4 dias de cultivo, o meio foi centrifugado e parte do sobrenadante foi reservado para dosagem de atividade gelatinolítica e parte foi concentrado 20 vezes para análises em SDS-PAGE e zimogramas com substratos gelatina e queratina incorporados. A amostra apresentou bandas migrando de 100 a 30 kDa em zimograma com gelatina incorporada. Em SDS-PAGE com o substrato queratina foram observadas bandas de 75, 60, 50 e 45kDa. Todas as amostras foram inibidas por PMSF indicativo de serina peptidases. O substrato penas foi 80% degradado e apresentou 860 U/mL de atividade gelatinolítica. Estes resultados demosntram que esta amostra apresenta potencial para sua  utilização em processos industriais, podendo ser usadas na  degradação de resíduos. Os peptídeos gerados podem ser usados na suplementação de raçôes animais ou  em  formulaçôes da indústria de  cosméticos com hidrolisados da queratina.