ESCHERICHIA COLI ENTEROPATOGÊNICA (EPEC) ATÍPICA: INDUÇÃO DE UM MECANISMO ANTIFAGOCÍTICO

Keyde Cristina Martins de Melo (IBU); Rafael Marques Porto (IBU); Daniel Carvalho Pimenta (IBU); Osvaldo Augusto Sant'anna (IBU); Rita de Cassia Ruiz (IBU)

Introdução: Fagocitose é o primeiro passo para o mecanismo de defesa da imunidade inata. O desenvolvimento de um mecanismo anti-fagocítico ajuda a colonização das células epiteliais intestinais por bactérias entéricas, retardando a ativação da resposta imune. Sabe-se que a interação de EPEC típica com células fagocíticas resulta na inibição do engolfamento devido à inibição de uma PI3-quinase, necessária à polimerização da actina em macrófagos. Esta inibição requer tanto o sistema de secreção tipo III como os componentes da maquinaria de translocação e depende da interação bactéria-macrófago. Recentemente, demonstramos que o fator antifagocítico de EPEC atípica (O55:H7) é secretado pela bactéria, já que a incubação prévia dos macrófagos com o sobrenadante da cultura reduziu, significativamente, a fagocitose de uma amostra controle.Objetivo: Investigar a existência de um mecanismo antifagocítico em EPEC atípica. Material e Métodos: Sobrenadante das culturas bacterianas de EPEC atípica (O55:H7) e C600 (E.coli comensal) crescidas em TSB,  foram submetido a  Extração em Fase Sólida (SPE-18) e HPLC. As frações obtidas em ambos os procedimentos foram adicionadas sobre as culturas de macrófagos aderidas a lamínulas, durante 30 min. Em seguida, as células foram infectadas com E2348/69 ou com levedos Sacharomices cerevisae durante 1 h a 37^oC. As lamínulas foram lavadas, fixadas e coradas com Giemsa ou tratadas com gentamicina para a determinação da UFC. Resultados e Discussão: A fração eluída com 25% de acetonitrila (25%-ACN), originária do isolado O55:H7 obtida por SPE-18, inibiu 100% a fagocitose da amostra bacteriana controle. Além disso, essa fração foi capaz de inibir significativamente também a fagocitose de levedos, quando comparado aos controles obtidos pelo mesmo fracionamento (C600 e meio TSB). Esses resultados mostram claramente que o produto obtido do fracionamento do sobrenadante não só potencializa a capacidade antifagocítica, observada inicialmente em procariontes, mas também reduz de forma significativa a fagocitose de eucariontes. Conclusão: O fator responsável pela anti-fagocitose induzido pela EPEC atípica (O55:H7) é hidrosolúvel e secretado no meio de cultura, diferente do mecanismo descrito para EPEC típica. Apoio Financeiro: FAPESP, CAPES.