DESENVOLVIMENTO DE UM IMUNOSSENSOR BASEADO EM FIBRA ÓPTICA PARA DETECÇÃO DE CÉLULAS EM ÁGUA E OUTROS FLUIDOS

Nathália Corrêa Chagas de Souza (EQ); Carolina Beres (LIF); Fabio de Nazaré (LIF); Eduardo Shigueo Yugue (LIF); Cesar Cosenza de Carvalho (LIF); José Luiz Sliva Neto (LIF); Andrea Medeiros Salgado (EQ); Marcelo Martins Werneck (LIF); Maria Helena da Silva (IMPPG); Marco Antonio Lemos Miguel (LIF)

A detecção de células em fluidos é uma ferramenta importante na verificação da qualidade em diferentes processos. Na indústria alimentícia a detecção de leucócitos em leite pode estar associada a infecções no animal produtor. A detecção de hemácias ou bactérias na urina, por exemplo, é associada a infecções ou outros processos patológicos. A presença da bactéria Escherichia coli ou de alguns parasitas no ambiente indica contaminação fecal em água, solo ou vegetais. Um grande número de metodologias tem sido descrita visando a detecção de células ou microrganismos em alimentos, solo e água, porém tais técnicas requerem no mínimo 24 horas, além de equipamentos e pessoal especializado. Este intervalo para obtenção dos resultados pode resultar na contaminação de um grande número de pessoas, além de perdas econômicas. Os imunossensores representam uma tecnologia com grande potencial para atender a rapidez e sensibilidade exigida nestes casos, podendo, independentemente do estado fisiológico das células, propiciar detecções em tempo real de forma específica, devido à presença de anticorpos. Desta forma, nosso trabalho objetiva a fabricação de um imunossensor baseado em fibra óptica plástica (metacrilato de polimetila). Em sua elaboração estão sendo utilizadas hemácias humanas e bactérias, como células alvo. As fibras são modificadas para formação de uma área sensível (“taper”), através de aquecimento e estiramento das mesmas, esta região sofre tratamento químico e posterior sensibilização utilizando-se anticorpos específicos para cada tipo celular. A eficiência de ligação dos mesmos foi analisada por microscopia ótica e eletrônica, assim como através da avaliação do sinal obtido através das fibras durante interação com as células alvo. Para tal utilizou-se uma fonte luminosa (Diodo Emissor de Luz-540 nm), sendo a luz transmitida pela fibra e detectada no final desta por um fotodetector. A geometria das fibras também está sendo estudada e avaliada, fibras com diferentes diâmetros e conformações (curvas ou retas) foram comparadas. Resultados prévios revelaram que ocorre ligação das células à superfície das fibras de forma específica, provocando atenuações no sinal gerado, sugerindo a manutenção da eficiência dos anticorpos e do protocolo utilizado. A manutenção da estabilidade do sensor frente a diferentes condições ambientais esta sendo avaliada.