| Área: Ecologia Microbiana ( Divisão I )
AVALIAÇÃO DA CAPACIDADE ENDOFÍTICA DE BACILLUS THURINGIENSIS EM PLANTAS DE CANA-DE-AÇÚCAR
Leona Melo (UFRJ); Patrícia Gitahy (EMBRAPA/CNPAB); Paulo Boa Sort (UFRRJ); José Baldani (EMBRAPA/CNPAB); Jordano Avelar (EMBRAPA/CNPAB)
ResumoBactérias endofíticas são aquelas que habitam o interior de tecidos vegetais sem causar dano aparente aos mesmos. Com o objetivo de verificar a natureza endofítica de Bacillus thuringiensis (Bt) e sua persistência no interior de tecidos de cana-de-açúcar em nível de campo, plântulas micropropagadas da variedade SP701143 foram inoculadas com Bt subsp. kurstaki S76. Este microrganismo apresenta atividade entomopatogênica contra larvas da broca da cana-de-açúcar Diatraea saccharalis. As plantas foram aclimatadas, transferidas para vasos e transplantadas para o campo experimental da Embrapa Agrobiologia, Seropédica-RJ, onde permanecem há aproximadamente sete anos. O reisolamento das bactérias inoculadas do interior dos tecidos vegetais foi realizado através da extração do líquido apoplástico coletado das plantas da 4a soca. As amostras foram pasteurizadas, plaqueadas em meio de cultura LB e as colônias obtidas, analisadas morfologicamente e por microscopia ótica. Aproximadamente 30 colônias bacterianas morfologicamente diferentes foram isoladas sendo que 12 destas bactérias apresentaram características de células de Bacillus após a análise por microscopia ótica de contraste de fase. Seis dessas colônias eram provenientes de plantas inoculadas e as outras seis de plantas não inoculadas. Foi realizada a extração de DNA das 12 colônias após o cultivo em meio líquido LB seguido de amplificação por reação de PCR com iniciadores específicos para o gênero Bacillus. Foram observados produto de amplificação do tamanho esperado (aproximadamente 995 pares de base) para todos os isolados inclusive para a estirpe controle S76. A Eletroforese em Gel com Gradiente Desnaturante (DGGE) revelou a presença de várias bandas distintas tanto de colônias originárias de plantas inoculadas como de plantas controles. A presença de bandas em posições diferentes, sugere a presença de diversas espécies do gênero Bacillus, inclusive da bactéria inoculada S76, colonizando endofiticamente o apoplasto de plantas de cana-de-açúcar cultivadas em condições de campo. Estudos adicionais deverão contribuir para um melhor entendimento sobre a interação entre B. thuringiensis e plantas de cana-de-açúcar, e avaliar novas formas de controle biológico considerando a possível capacidade endofítica de Bt em controlar insetos que se alimentam dos tecidos internos de plantas de cana.
Palavras-chave: Controle Biológico, Persistência, Broca da cana |