CARACTERIZAÇÃO PARCIAL DO SECRETOMA DE CHROMOBACTERIUM VIOLACEUM

Alessandra Ciprandi (UFPA); Wanderson Marques Silva (UFMG); Vasco Azevedo (UFMG); Maria Paula Schneider (UFPA); Artur Silva (UFPA)

A Chromobacterium violaceum é uma beta-proteobactéria Gram-negativa comum da microbiota tropical. Como outros microorganismos de vida livre, esta bactéria está exposta a condições ambientais muito variáveis, que exigem grande adaptabilidade e sistemas de proteção eficientes. O sequenciamento do seu genoma revelou o potencial uso biotecnológico e lançou as bases para estudos proteômicos que poderão elucidar o status funcional da resposta celular aos estímulos ambientais. As proteínas secretadas pelas bactérias apresentam importantes funções remotas na nutrição, comunicação celular e detoxificação. Essas funções podem ser melhor entendidas através do análise do secretoma, o proteoma das proteínas secretadas. Uma vez que proteínas secretadas desempenham uma variedade de funções importantes na sobrevivência bacteriana no ambiente, este trabalho tem como objetivo caracterizar as diversas proteínas secretadas da C. violaceum ATCC 12472. A bactéria foi crescida em meio quimicamente definido a 28ºC por 20 h sob leve agitação. Após o cultivo, foi utilizada a técnica Three-phase partitioning para extrair as proteínas secretadas e a concentração protéica foi determinada através do kit 2D Quant. Foi feita uma eletroforese bidimensional para avaliar o perfil das proteínas expressas, utilizando tiras de gel com pH imobilizado 3-10 NL de 18 cm. As imagens foram analisadas com o programa Image Master Platinum 7.0. Os resultados mostraram a presença de 338 spots. O perfil eletroforético apresentou spots com pesos moleculares distribuídos entre 12 e 72 kDa e pode-se observar uma maior concentração na faixa de pI 4 a 7. A identificação dessas proteínas por espectrometria de massas aumentará nosso entendimento sobre a interação e adaptação da bactéria ao o meio ambiente, favorecendo a exploração do seu potencial biotecnológico.
Apoio Financeiro : Eletronorte S/A, CAPES, CNPq e FAPESPA