A INTERNALIZAÇÃO DE PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS POR CÉLULAS DENDRÍTICAS PODE SER FACILITADA POR GALECTINA-3

Vânia Sammartino Mariano (FMRP-USP); Luciana Pereira Ruas (FMRP-USP); Maria Cristina Roque Barreira (FMRP-USP)

Introdução: O fungo Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da principal micose sistêmica da América Latina. Galectina-3, uma proteína ligante de β-lactosídeos, está expressa em várias células do sistema imune, como células dendríticas e macrófagos. Em macrófagos, galectina-3 está localizada nos cups fagocíticos e no fagossomo, contribuindo para fagocitose. Muitos trabalhos relatam que galectina-3 é capaz de reconhecer glicanas presentes na superfície de microrganismos patogênicos, participando da imunidade inata contra esses patógenos. Nosso grupo mostrou que galectina-3 interfere na imunidade contra P. brasiliensis,Toxoplasma gondii e Rhodococcus equi. Relatamos que camundongos nocautes de galectina-3 são suscetiveis à infecção por P. brasiliensis por alterar a produção de citocinas pela célula hospedeira. Além disso, sabe-se que as células dendríticas são as mais efetivas células apresentadoras de antígenos capazes de induzir resposta imune celular protetora contra a doença. Objetivos: Com base nessas informações, fomos investigar a participação de galectina-3 na internalização de leveduras de P. brasiliensis por células dendríticas, bem como avaliar se o fungo expressa ligantes para galectina-3. Métodos e Resultados: Células dendríticas derivadas da medula óssea de camundongos nocautes ou selvagens para galectina-3 foram cultivadas com leveduras de P. brasiliensis na proporção de 6:1 durante 4 horas a 4°C. A internalização foi avaliada indiretamente através do crescimento fúngico em ágar-BHI após semeadura da suspensão de células rompidas. Os resultados obtidos revelam que animais nocautes, comparados com os controles, internalizam 5 vezes menos leveduras. Para análise de ligantes de galectina-3 em leveduras de P. brasiliensis, preparações contendo antígenos de P. brasiliensis (PbAg) e parede fúngica (CWAg) foram submetidas a SDS-PAGE, transferidas para membrana de nitrocelulose e incubada com galectina-3 recombinante. O Western blot revelou que galectina-3 reconhece proteínas presentes no extrato de P. brasiliensis, especialmente na parede fúngica. Conclusão: Nossos resultados sugerem que a capacidade de galectina-3 interagir com ligantes expressos na superfície fúngica possa favorecer a internalização de P. brasiliensis por células dendríticas, colaborando para a suscetibilidade de camundongos nocautes de galectina-3 à infecção. Apoio financeiro: FAPESP e CNPq