ANÁLISE DA DIVERSIDADE PROCARIOTA EXTRAÍDA DO SOLO DE MONTE ALEGRE (PARÁ) USANDO ABORDAGENS METAGENÔMICAS.

Rafael Ribeiro Barata (UFPA); Rommel Mario Rodríguez Burbano (UFPA); Maria Paula Cruz Schneider (UFPA); Artur Luiz da Costa da Silva (UFPA)

A diversidade procariótica do solo ainda é pouco conhecida, estimativas sugerem que menos de 1% de toda a diversidade microbiana existente pode ser cultivada em laboratório. Abordagens metagenômica constituem uma ferramenta muito útil na caracterização tanto da diversidade como também de novos genes e rotas. Este estudo visa caracterizar a biodiversidade microbiana do solo de Monte Alegre (PA) usando abordagens independente de cultivo baseada no seqüenciamento nucleotídico da subunidade 16S do rRNA. Monte Alegre é um município localizado na porção noroeste do estado do Pará, na margem esquerda do rio Amazonas. A coleta do solo foi realizada em seis pontos da gruta da Pedra do Pilão que encontra-se na serra do Paituna que faz parte do Domo de Monte Alegre, uma elevação topográfica localizada na Bacia do Médio Amazonas. Na extração do DNA ambiental foi usado o "Ultra Clean Soil DNA kit". Depois, foi amplificado o gene 16S rDNA através da reação de PCR usando 'primers' universais, tanto para bactérias quanto para arquéias, em seguida, foram purificadas, ligadas e transformadas em bactérias eletrocompetentes. Os "reads" sequenciados foram comparados com o banco de dados ARB/SILVA. No total foram analisadas 95 sequências, dessas, 57 pertencem ao domínio Bactéria e 38 ao domínio Arquéia. As bactérias foram classificadas em sete filos, onde os mais representativos foram as Proteobactérias (45%) seguidas pelas Cianobactérias (18%), sendo que, 5% dos segmentos são de bactérias não cultiváveis que não possuíam nenhum "match" no banco de dados. Analisando-as no nível de família, 77% estão distribuídas em 17 táxons, das quais os mais significativos pertencem ao grupo Burkholderiaceae (14%), Acidobacteriaceae (12%), Acetobacteraceae (9%) e Oxalobacteraceae (9%). Os outros 23% não apresentaram classificação quanto a família, com base no ARB/SILVA. A totalidade de arquéias foram classificadas como 'environmental samples' e dessas 71,05% foram classificadas como Crenarchaeota e 2,63% pertencem ao filo Euryarchaeota. As bactérias que não pertencem a nenhuma família e a grande quantidade de 'environmental samples' que somente foram classificadas ao nível de filo demonstra o pouco conhecimento que se tem a respeito da diversidade procariota do solo e a necessidade de ampliação dos estudos na área.