AÇÃO DO ANTIFÚNGICO ANFOTERICINA B SOBRE CEPA DO FUNGO DEMÁCEO CURVULARIA SP OBSERVADA ATRAVÉS DA INIBIÇÃO DO CRESCIMENTO DE HIFAS EM TEMPO REAL E ANÁLISE ULTRAESTRUTURAL DO MICELIO TRATADO

Fernanda Simas Correa Biancalana (FCM-UNICAMP); Luzia Lyra (FCM-UNICAMP); Adriano Biancalana (CCS-UFRJ); Angelica Zaninelli Schreiber (FCM-UNICAMP)

Anfotericina B é muito utilizada no combate a infecções fúngicas por fungos filamentosos, incluindo as causadas por fungos demáceos. Em seu mecanismo de ação está a capacidade de se ligar ao ergosterol presente na membrana do fungo, formação de poros químicos, perda de sua permeabilidade e extravasamento de conteúdo celular. Embora as hifas sejam a forma predominante em tecidos de indivíduos infectados, a grande maioria dos estudos de suscetibilidade de fungos demáceos frente a Anfotericina B utiliza conídios, como preconizado pelo CLSI M38-A2 (2008). Uma forma de avaliar a suscetibilidade de hifas é através do equipamento BioCell-Tracer, onde o antifúngico tem contato direto com as hifas e observa-se seu comportamento em tempo real. Outra forma de avaliação, pouco citada na literatura, é a observação em microscopia eletrônica dos efeitos morfológicos e estruturais ocorridos na hifa. Este estudo teve como objetivo avaliar a ação da Anfotericina B através de taxa de inibição de crescimento de hifas em tempo real e análise ultraestrutural do micélio do fungo demáceo Curvularia sp. O valor da concentração inibitória mínima (CIM) de 0,5mg/mL, obtido por microdiluição em caldo foi a concentração inicial nos testes de inibição do crescimento de hifas. Na análise ultraestrutural foram feitas imagens do micélio antes e após o contato com o antifúngico, em microscopia de luz, varredura e transmissão. As taxas de inibição de crescimento foram de 100% na concentração equivalente à CIM e em uma concentração abaixo desta e de 88,6% na segunda concentração abaixo da CIM, sugerindo que a forma de hifa é mais suscetível que a de conídios frente a Anfotericina B. Na análise ultraestrutural foi possível observar, nas imagens de microscopia eletrônica de varredura, que as hifas, após o contato com o antifúngico, se tornaram achatadas e finas. Nas imagens de microscopia de transmissão de luz foi possível observar somente a parede das hifas, devido ao extravasamento dos componentes celulares provocado pela ação do antifúngico.