TOLERÂNCIA DE PH E DE METAIS EM BACTÉRIAS DEGRADADORAS DE NAFTALENO ISOLADAS DE AMBIENTE DE MINERAÇÃO DE CARVÃO EM CRICIÚMA, SANTA CATARINA

Gabriela Scholante Delabary (Univali); Marcus Adonai Castro-silva (Univali)

O naftaneno é um hidrocarboneto poliaromático que surge no meio ambiente como contaminação do solo pela mineração do carvão.  Outro problema ambiental gerado por esta atividade é a drenagem ácida de mineração (DAM), resultando da dissolução da oxidação biológica acelerada dos minerais sulfídicos a partir da pirita. Organismos acidofílicos estão presentes em ambientes ácidos, possuindo resistência aos metais pesados e interessante potencial de biorremediação. Deste modo, o objetivo do trabalho consiste na determinação do crescimento de 3 bactérias, isoladas de ambientes impactados com a mineração de carvão, em diferentes valores de pH e caracterizá-los quanto a resistência a diferentes metais pesados. O teste de pH foi avaliado em meio Waye, ajustado para os valores de pH: 2, 3, 4, 5, 6, e 7. Posteriormente, 2ml dos meios de cultura foram distribuídos em microplacas de 24 poços, em triplicata para cada valor de pH, e mais um controle não inoculado para cada pH a ser testado. Os poços foram inoculados com 100ml de pré-cultura em meio Waye (pH 3,0, incubados a 30ºC por 7 dias), e as placas foram mantidas por 7 dias a 30ºC .As leituras (DO_595nm)  foram realizadas logo após a inoculação e após 7 dias. Para a determinação das concentrações toleradas dos metais, as bactérias foram cultivados em meio Waye contendo diferentes concentrações (0,1, 0,5, 1, 5, 10 e 20mM) dos sais metálicos ZnCl₂, CuCl₂*2H2O, NiCl₂*6H₂O e Na₂O₃Se. A partir de uma pré-cultura, foram inoculadas 100ml por tubo, tendo o volume final do meio com metais igual a 10ml. Para comparação, foi realizado um controle não inoculado e outro inoculado. As leituras (DO_600nm) foram realizadas após a inoculação e duas semanas depois da incubação a 30ºC. Os resultados obtidos a partir do teste de pH demonstram que 2 bactérias possuíram crescimento nos valores de pH de 3 a 5, enquanto 1 bactéria cresceu na faixa de pH de  2 a 4, com isso pode- se concluir que os isolados são acidofílicos e não ácido tolerantes. Com relação á tolerância aos metais, a maior concentração de resistência foi 5mM para os metais níquel e zinco. Uma característica de todos os organismos acidofílicos é que além da sua tolerância a acidez, também são capaz de resistir a altas concentrações de metais pesados, visto que um dos efeitos da DAM é a solubilização dos mesmos, resultando na acumulação destes elementos tóxicos no ambiente.