| Área: Microbiologia Clinica ( Divisão A )
DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DO MÉTODO DE ENUMERAÇÃO MICROBIANA NO XAROPE DE ZIDOVUDINA
Selma V V Ramos, Severino G. Junior Pedro J. Rolim, Eulália A. Ximenes (LAFEPE); Eulalia A. Ximenes Ximenes (UFPE); Pedro J. Rolim Rolim (UFPE)
Resumo
A validação de metodologia analítica assegura a qualidade do produto e cumpre com as normas de Boas Práticas de Laboratório (BPL) determinadas pelos compêndios oficiais. Este trabalho teve por objetivo validar o método de enumeração microbiana que foi realizado em duas etapas: a neutralização do conservante e a validação da enumeração microbiana propriamente dita.Na neutralização foi utilizado polissorbato 80 e lecitina de soja como agentes neutralizantes e na enumeração microbiana foram determinados os seguintes parâmetros: precisão, exatidão, linearidade e robustez. Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 8739, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404 foram utilizados como microrganismos teste e inoculados uma concentração de 10-30 UFC/placa ou 30-300 UFC/placa. O experimento contou com três grupos de análise: um grupo amostra composto pelo medicamento diluído em Caldo Casoy contendo neutralizante, um grupo peptona contendo salina-peptonada em substituição ao medicamento e um grupo viabilidade constituído pelo Caldo Casoy. Na validação da neutralização recuperações dos microrganismos acima de 70% entre o grupo amostra e o grupo peptona, demonstra eficácia do neutralizante e entre o grupo peptona e viabilidade que este não possui toxicidade. A precisão foi determinada através da repetibilidade e precisão intermediária. A exatidão foi determinada por um mesmo operador com dois níveis de incriminação microbiana. A robustez foi determinada a partir da utilização de diferentes fabricantes de meios de cultura, diferentes temperaturas de incubação e diferentes concentrações de polissorbato 80. A linearidade foi determinada por regressão linear pelo método dos mínimos quadrados com seis concentrações diferentes dos microrganismos. Os resultados demonstraram que os agentes neutralizantes foram eficazes e não tóxicos para todos microrganismos estudados com recuperações superiores a 92,93%. Na precisão o método apresentou valores de CV(%) entre 4,27-7,70. Na exatidão os percentuais de recuperação foram entre 92,86 e 99,89%. A análise de regressão linear demonstrou coeficientes de correlação linear superiores a 0,95. O método foi robusto não apresentando diferenças estatisticamente significativas. A metodologia empregada demonstrou que atende aos requisitos de BPL, apresentando precisão, exatidão, linearidade e robustez.
Palavras-chave: enumeração, qualidade, validação, xarope, zidovudina |