TOXINAS TERMO-LÁBIL (LT) E TERMO-ESTÁVEL (ST) PRODUZIDAS POR ESCHERICHIA COLI ENTEROTOXIGÊNICA: EXPRESSÃO EM DIFERENTES MEIOS DE ENRIQUECIMENTO

Letícia Barboza Rocha (IBU); Christiane Yumi Ozaki (IBU); Denise Silvina Piccini Quintas Horton (IBU); Roxane Maria Fontes Piazza (IBU)

Introdução: Dentre as categorias de Escherichia coli diarreiogênicas, a Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) é responsável por até 10 % das diarréias no Brasil. ETEC produz as toxinas termo-estável (ST) e/ou termo-lábil (LT), o que permite sua utilização para fins de diagnóstico. O aumento da expressão e liberação dessas toxinas depende do meio em que a bactéria é cultivada. Existem vários meios de cultivo descritos para crescimento de ETEC, que podem conter também sais de bile ou lincomicina para aumentar a produção e/ou liberação de LT. Objetivos: Avaliar o crescimento bacteriano de ETEC e a expressão de LT e ST em diferentes meios de enriquecimento. Material e métodos: O isolado H10407 (ETEC produtora de LT e ST) foi cultivado durante 24 horas em cinco meios distintos: Evans, Syncase, Tryptic Soy Broth, E. coli  (EC) and Dulbecco’s Modified Eagle Medium. O crescimento bacteriano foi mensurado a 588nm e a expressão das toxinas detectada no sobrenadante por ELISA. A seguir, o meio que possibilitou a maior expressão foi adicionado de ciprofloxacina ou lincomicina e novamente avaliado. Além disso, 31 isolados de ETEC foram testados nessas últimas condições, investigando-se a presença das toxinas no sobrenadante e no lisado celular tratado com uréia. Resultados: O isolado H10407, apresentou maior expressão das toxinas quando cultivado em caldo EC. Em presença de lincomicina, apesar do menor crescimento bacteriano, a produção de LT e ST foi consideravelmente maior em relação ao meio sem antibiótico. Na presença de antibióticos, o restante do isolados estudados apresentou uma grande dispersão na produção de LT, alguns isolados expressaram maior quantidade de toxina em presença de ciprofloxacina e outros em presença de lincomicina. Por outro lado, 85% dos isolados produtores de ST apresentaram produção considerável da toxina em presença de ciprofloxacina. Conclusão: Neste estudo confirmamos que o meio EC pode também ser empregado para aumentar a produção/liberação de toxinas de ETEC e a adição de antibióticos incrementa essa condição.