DETECÇÃO DE MYCOBACTERIUM AVIUM SSP. PARATUBERCULOSIS (MAP) EM AMOSTRAS DE LEITE NO BRASIL

Isabel Azevedo Carvalho (UFV); Maria Aparecida Scatamburlo Moreira (UFV); Abelardo Silva Júnior (UFV); Vinicius Eustáquio Barreto Campos (UFV)

A paratuberculose é uma doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis (MAP), que acomete  todas as espécies de ruminantes, caracterizada por má absorção, diarréia e perda de peso progressiva. A doença tem grande impacto econômico, estimado em cerca de 150 milhões de dólares por ano somente nos Estados Unidos, devido ao decréscimo na produção de leite, descarte prematuro de animais e aumento dos custos sanitários. A doença também tem importância em Saúde Pública, considerando que o agente etiológico tem sido associado à doença de Crohn em humanos e o possível veículo de transmissão do microrganismo seria o leite. No Brasil, não existem estudos sobre a prevalência da paratuberculose  e sobre seu impacto econômico. Os objetivos desse estudo foram fazer um levantamento inicial sobre a doença em propriedades leiteiras na região de Viçosa - MG, e avaliar o limite de detecção da técnica de PCR para detecção de MAP em amostras de leite cru. Assepticamente, foi coletada dos quatro tetos, uma amostra única por animal. Foi feita a extração de DNA de todas as amostras de leite, para posterior realização da PCR. As 206 amostras de leite foram testadas utilizando-se os oligonucleotídeos IS900BN1/IS900BN2. Oito amostras (3,6%) amplificaram fragmentos de tamanho esperado (626pb) e foram clonadas e enviadas para sequenciamento. Dessas, três (37.5%) foram sequenciadas com sucesso e a análise genética revelou 99% de identidade entre as sequências obtidas nesse estudo e a sequência IS900 depositada no GenBank. O limite de detecção da técnica foi avaliado por meio de diluições seriadas do DNA plasmidial extraído do clone do controle positivo e o limite mínimo encontrado foi de aproximadamente 140 a 180 UFC/ml de leite. Esse é o primeiro trabalho que relata a detecção de MAP em amostras de leite cru no Brasil.