| Área: Fermentação e Biotecnologia ( Divisão J ) PRODUÇÃO DE ENZIMAS CELULOLÍTICAS E UTILIZAÇÃO NA HIDRÓLISE ENZIMÁTICA DE BAGAÇO DE CANA-DE-AÇÚCAR
Gisele Silva de Oliveira (UFG); Guilhermar Ramos de Melo (UFG); Márcio José Poças-fonseca (UNB); Ildinete da Silva Pereira (UNB); Fabricia Paula de Faria (UFG)
Resumo
Introdução: O bioetanol ou etanol de segunda geração (produzido a partir da biomassa lignocelulósica) vem sendo mundialmente considerado uma importante alternativa ao uso da gasolina. O potencial da transformação de componentes da biomassa, principalmente do bagaço de cana, em açúcares baseia-se na hidrólise enzimática completa da celulose visando à produção de etanol. A hidrólise enzimática ocorre através da ação de enzimas celulolíticas na biomassa, que podem ser classificadas em endoglicanases, exoglicanases e beta-glicosidases. As enzimas celulolíticas são produzidas por diferentes microrganismos, sendo fungos filamentosos os mais eficientes produtores. No presente trabalho foi descrito a hidrólise enzimática do bagaço de cana-de-açúcar pré-tratado com ácido utilizando uma celulase recombinante (celobiohidrolase CBH1.2) do fungo Humicola grisea produzida por Pichia pastoris (PpCBH1.2) e o " pool" de enzimas produzido pelo fungo Trichoderma reesei RUT C30 (PETR).
Materiais e Métodos: As misturas enzimáticas foram produzidas por fermentação submersa e concentradas por ultrafiltração para a obtenção de preparações com a carga de enzima necessária para a padronização dos ensaios de hidrólise. A hidrólise foi realizada em shaker rotatório à 50º C e 180 rpm durante 48 h. Foram utilizados 25 g de substrato por litro de mistura nas seguintes reações: 1. PETR (10 FPU/g); 2. PETR (10 FPU/g) + PpCBH1.2 (0,8 FPU/g); 3. (10 FPU/g) + PpCBH1.2 (1,6 FPU/g); (10 FPU/g) + PpCBH1.2 (3,2 FPU/g)
Resultados e Conclusões: A concentração de açúcar redutor aumentou ao longo do tempo de hidrólise atingindo o valor máximo após 48 h de incubação em todas as reações. Nas reações 2, 3 e 4 obteve-se 5,6% de aumento de açúcar redutor quando acrescentado 3,2 FPU/g de CBH1.2r. Os resultados para hidrólise do bagaço de cana indicam um aumento de rendimento da hidrólise de 13% quando acrescentado 0,8 FPU/g de CBH1.2r, no entanto observa-se uma redução do rendimento quando se aumenta a quantidade de CBH1.2r para 1,6 e 3,2 FPU/g.
Palavras-chave: bioetanol, celobiohidrolase, enzimas celulolíticas, hidrólise, Pichia pastoris |