COMPARAÇÃO DE MÉTODOS PARA DETECÇÃO DE BIOFILME EM ESTAFILOCOCOS COAGULASE-NEGATIVA.

Adilson Oliveira (IBB - UNESP); Marcus Vinicius Pimenta Rodrigues (FMB-UNESP); Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha (IBB - UNESP)

Os estafilococos coagulase-negativa (ECN) estão entre os microrganismos mais envolvidos em infecções nosocomiais, principalmente em recém-nascidos (RN) prematuros e de baixo peso. Entre os fatores de risco para infecções por esses agentes, a produção de um polissacarídeo extracelular e a conseqüente formação do biofilme, permitindo aderência às superfícies plásticas e lisas de cateteres e outros dispositivos médicos desempenham um papel importante. O biofilme consiste de camadas de células agrupadas e embutidas numa matrix de um polissacarídeo extracelular, denominado polysaccharide intercellular adhesin (PIA). A produção do PIA é mediada por produtos do gene cromossomal ica (intercelular adhesion), organizados em uma estrutura operon. Este operon contém os genes icaADBC, mais o icaR, que tem a função regulatória e é transcrito no sentido oposto. Assim que ocorre a ativação deste operon, são codificadas quatros proteínas necessárias para a síntese do PIA que são IcaA, IcaD, IcaB e IcaC. Uma coleção de 100 amostras de ECN, sendo 50 isoladas de pontas de cateteres e 30 de hemoculturas obtidas de RN da Unidade Neonatal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP e 20 obtidas de fossas nasais de portadores saudáveis foram analisadas quanto à produção de biofilme pelos métodos do tubo (TM), ágar vermelho congo (CRA) e através do método quantitativo de aderência a placa de poliestireno (TCP). Esses métodos foram comparados com a pesquisa dos genes icaA, icaD e icaC envolvidos na produção de biofilme em ECN. Das 100 amostras de ECN estudadas, 82% foram positivas pela técnica de PCR, 82% pelo método do tubo, 81% pelo método da placa de poliestireno e 76% pelo ágar vermelho congo. Feita a comparação dos métodos utilizados, tendo por referência o PCR, observamos que o método que melhor se correlacionou com a pesquisa dos genes ica, foi o método de aderência em tubo de borossilicato, com uma sensibilidade e especificidade de 100% e boa concordância quando comparado à técnica de PCR. O método do tubo pode ser indicado para o uso de rotina para a pesquisa de biofilme por ECN por ser fácil, rápido, apresentar um baixo custo e principalmente por garantir resultados confiáveis com ótima sensibilidade e especificidade.