MECANISMO DE APOPTOSE EM CEREBELO, LINFONODO E LEUCÓCITOS DE CÃES NATURALMENTE INFECTADOS PELO VÍRUS DA CINOMOSE CANINA

Helen Lima Del Puerto (ICB-UFMG); Almir de Sousa Martins (ICB-UFMG); Fabiana Alves (EV-UFMG); Gissandra Farias Braz (EV-UFMG); Fernanda Gonçalves de Oliveira (EV-UFMG); Anilton César Vasconcelos (ICB-UFMG)

A cinomose canina (CC) é uma doença imunossupressiva causada pelo vírus da cinomose canina (VCC), que pode acarretar complicações no SNC. Cães naturalmente infectados pelo VCC apresentam células em apoptose no tecido linfóide e cerebelo, mas os mecanismos da apoptose na infecção pelo VCC ainda não foram bem descritos. O objetivo desse estudo foi avaliar as vias de apoptose na infecção pelo VCC analisando a expressão de mRNA dos genes anti e pro apoptóticos Bax, Bcl-2, Caspases-3, -8 e -9 em sangue periférico, linfonodos e cerebelo de cães infectados pelo VCC (VCC+) e de cães não infectados pelo VCC (VCC-). Sangue de 20 cães clinicamente suspeitos da infecção pelo VCC e de 12 cães clinicamente saudáveis foram utilizadas para o diagnóstico do VCC através de RT-PCR. RNA de leucócitos periféricos de 12 cães VCC+ e de 8 cães VCC-, e RNA do cerebelo e linfonodos de 4 dos 8 cães VCC+ e de 3 dos 8 cães VCC- (necropsiados pos mortem) foram reverso transcritos e a expressão dos genes alvos quantificada pelo PCR em tempo real. Test t de Student não pareado foi utilizado para a estatística comparando-se os grupos VCC+ e VCC-, e considerados estatisticamente significantes quando p<0.05. O diagnóstico do VCC através de RT-PCR em 20 cães clinicamente suspeitos resultou em 12 cães VCC+ (60%), e dos 12 cães clinicamente sadios 8 foram confirmados VCC- (67%). A expressão gênica de caspases-3, -8, -9, Bax e Bcl-2 em sangue periférico não apresentou diferença estatística entre os cães VCC+ (n=12) e VCC- (n=8). A expressão de Bax, caspase-3, -8 e -9 foi signifativamente maior (p<0.05) no cerebelo de cães VCC+ (n=4) em comparação com os cães VCC- (n=3). Adicionalmente, a expressão de caspase-3 e -8 foi significativamente maior (p<0.05) em linfonodos de cães VCC+ (n=4) quando comparado com os cães VCC- (n=3). A RT-PCR para o diagnóstico do VCC foi capaz de detectar o VCC em cães clinicamente saudáveis, o que a torna uma ferramenta sensível e específica para o diagnóstico do VCC e para futuros estudos epidemiológicos. Os resultados sugerem que o VCC induz apoptose em linfonodos através da ativação de caspase-3, iniciada pela caspase-8; e a indução no cerebelo através da ativação da caspase-3, iniciada pela caspase-8 e pela via mitocondrial através da caspase-9. Agradecimentos: FAPEMIG, CNPq, CAPES e FEP-MVZ.