IMPLEMENTAÇÃO DE METODOLOGIA PARA MONITORIZAÇÃO DE CONTAMINAÇÃO MICROBIANA NO AMBIENTE DE PRODUÇÃO DE MATRIZES DE CAMUNDONGOS E DE RATOS LIVRES DE AGENTES PATOGÊNICOS ESPECIFICADOS

Silvio Rogério Cardozo dos Santos (CEMIB/UNICAMP); Clarice Yukari Minagawa (CEMIB/UNICAMP); Edivana Aparecida Vespa Alves (CEMIB/UNICAMP); Rovilson Gilioli (CEMIB/UNICAMP); Delma Pegolo Alves (CEMIB/UNICAMP)

Camundongos e ratos livres de agentes patogênicos especificados são modelos animais adequados para a avaliação de fenômenos biológicos em pesquisas. Na área de Gnotobiologia do CEMIB/Unicamp suas matrizes são mantidas sob rigoroso sistema de barreiras sanitárias e em unidades isoladoras. O objetivo desse estudo foi monitorar e validar diferentes processos adotados para o controle de contaminação microbiana na Área de Gnotobiologia. Para efeito comparativo, as amostras foram semeadas em Agar Nutriente antes e após a desinfecção do ambiente. Para isolamento de bactérias do ar, as placas ficaram expostas no ambiente onde os animais são mantidos, por 1 hora e incubadas por 48 horas a 37ºC. Esta técnica também foi realizada junto aos difusores do sistema de ventilação. Nos braços e luvas das unidades isoladoras realizou-se “swabs” de suas superfícies, que foram eluídos em caldo BHI e incubados por 24 horas a 37ºC. Após este período, o caldo foi semeado nos meios MacConkey, Cetrimida e NI, incubados por 48 horas a 37ºC. A identificação dos microrganismos se deu por meio de análise morfológica de colônias, coloração de Gram, meios de cultura seletivos e diferenciais e provas bioquímicas. Foram realizados testes de validação e eficiência das autoclaves, através do cultivo em meio de cultura, de fitas impregnadas com esporos de Geobacillus stearothermophyllus e de “pellets” de ração que foram expostos ao processo de esterilização em autoclave. Os testes microbiológicos indicaram redução no número total de unidades formadoras de colônias (UFC), demonstrando a eficiência dos processos de desinfecção ambiente. O sistema de ventilação apresentou contagem de UFC abaixo da referência aceitável, demonstrando a eficiência do sistema de ar e dos filtros utilizados. No monitoramento da autoclave, realizado semanalmente, foi observado 100% de eficácia no processo de esterilização utilizando-se G. stearothermophyllus e de 98,34% com “pellets” de ração. No teste qualitativo isolou-se: Staphylococcus sp coagulase negativo, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae e Alcaligenes faecalis. A presença desses agentes indicou a necessidade de melhoria nos métodos de limpeza, desinfecção, esterilização e anti-sepsia realizadas pelos técnicos da Área de Gnotobiologia, no qual houve a implementação de novos Procedimentos Operacionais Padronizados (POPs).