HEMOCULTURA E REAÇÃO EM CADEIA PELA POLIMERASE (PCR) NO DIAGNÓSTICO DA DOENÇA DE CHAGAS E LEISHMANIOSE VISCERAL EM CÃES

Luciano José Eloy (FMB/UNESP); Simone Baldini Lucheis (FMB/UNESP)

A doença de Chagas e a Leishmaniose Visceral Canina, que possuem como agentes etiológicos respectivamente o Trypanosoma cruzi (T.cruzi) e a Leishmania chagasi (L. chagasi), são zoonoses de grande importância, pois os cães participam ativamente do ciclo de transmissão destes parasitos. Este trabalho objetivou avaliar a ocorrência de T. cruzi e L. chagasi em cães e comparar os resultados das técnicas de hemocultura e Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) no diagnóstico destes parasitos. Foram colhidas 50 amostras de sangue de cães procedentes do Canil Municipal de Botucatu-SP. Para a hemocultura, cada amostra foi inoculada em três tubos, com 5mL de meio LIT (Liver Infusion Tryptose) em cada, separando-se as porções plasmática, leucocitária e sedimento de hemácias, e incubando-se a 28-30°C. A primeira leitura das culturas foi feita após dez dias da inoculação da amostra, sendo posteriormente observadas quinzenalmente, durante quatro meses. Ao término das leituras, todas as hemoculturas foram processadas para a extração do DNA. A identificação dos produtos amplificados (330pb para T. cruzi e 145pb para L. chagasi) foi realizada por eletroforese em gel de agarose. Das 50 amostras, dez (20%) foram positivas para T. cruzi, oito (16%) para L. chagasi e três (6%) foram positivos tanto para T. cruzi como para L. chagasi, à PCR. Quatro cães (8%) foram positivos à hemocultura. As hemoculturas positivas foram negativas à PCR para ambos os parasitos. As formas parasitárias foram melhor vizualizadas na porção do sedimento de hemácias. A diferença de positividade entre as duas técnicas é caracterizada pela alta sensibilidade e especificidade da PCR (variando entre 90 e 100%) em relação a hemocultura, a qual possui baixa sensibilidade e especificidade para tripanossomatídeos. A detecção destes parasitos em cães demonstra seu papel de reservatórios e fontes de infecção para o homem. O uso da técnica de PCR é um método eficiente de confirmação diagnóstica para a doença de Chagas e a Leishmaniose Visceral em cães, possuindo maior rapidez de execução em relação à hemocultura.