OCORRÊNCIA DO FUNGO HISTOPLASMA CAPSULATUM EM GUANOS DE CAVERNAS DOS PARQUES ESTADUAIS INTERVALES, TURÍSTICO DO ALTO RIBEIRA E MOSAICO DE JUCUPIRANGA: DETECÇÃO MOLECULAR POR NESTED-PCR.

Ana Paula Gouvêa Wiezel (Ekos Brasil); Tâmara Heloísa Rocha Prandini (UNESP); Heros Augusto Santos Lobo (Ekos Brasil); Severino Assis da Graça Macoris (UNESP); Sandra de Moraes Gimenes Bosco (UNESP); Eduardo Bagagli (UNESP)

A histoplasmose é uma micose sistêmica, que ocorre de maneira endêmica em algumas regiões, causada pelo fungo dimórfico Histoplasma capsulatum. A infecção é adquirida através da inalação de conídios presentes no ambiente, principalmente naquele em que haja grande concentração de excrementos de morcegos e aves, destacando-se cavernas e galinheiros. O presente estudo visou padronizar metodologia e realizar a detecção molecular do patógeno em guanos de cavernas. Foram analisadas 37 amostras ambientais provenientes dos Parques Estaduais: Intervales, Turístico do Alto Ribeira, Caverna do Diabo e Rio Turvo, estado de São Paulo, que abriga uma das maiores concentrações de cavernas do Brasil, muitas delas abertas ao uso público. Para verificar a ocorrência do fungo foi realizada a detecção molecular por Nested-PCR, método rápido, sensível e específico para a detecção do patógeno. A padronização da técnica visou a obtenção de controles positivos, tanto com DNA puro de H. capsulatum, quanto com amostra ambiental, representada esta por solo de caverna adicionado de leveduras de H. capsulatum, seguido da extração de DNA. A extração de DNA das 37 amostras ambientais coletadas de diferentes cavernas foi realizada utilizando-se do kit Mobio for Soil. Foram realizadas reações de PCR e Nested-PCR, empregando-se os primers ITS1/ITS4 e HC-1/HC-2 seguido da corrida eletroforética em gel de agarose. Das 37 amostras analisadas, 02 mostraram-se positivas para a detecção molecular do patógeno, sendo elas pertencentes às cavernas Alambari de Baixo (PETAR) e do Diabo (PECD). Portanto, os resultados obtidos sugerem a presença do H. capsulatum nestes locais, o que indica a necessidade de maiores estudos para se determinar os riscos de infecção pelo patógeno, para turistas, monitores ambientais, espeleólogos e pesquisadores.