PREVALÊNCIA DE ROTAVÍRUS EM CRIANÇAS DE 0-10 ANOS COM DIARRÉIA AGUDA NA CIDADE DE MANAUS

Dayane Martins Serfaty (UEA); Raquel Oliveira Pessoa (UEA); Luiz André Morais Mariuba (ILMD - Fiocruz); Paula Taquita Serra (UEA); Cristóvão Alves da Costa (INPA); Maria Edilene Martins de Almeida (UEA); Leidiane Amorim Soares (ILMD - Fiocruz); Luciana Pereira Sousa (ILMD - Fiocruz); Paulo Afonso Nogueira (ILMD - Fiocruz); Patricia Puccinelli Orlandi (ILMD - Fiocruz)

INTRODUÇÃO Rotavirus são considerados os maiores agentes etiológicos não bacterianos causadores de diarréia em crianças do mundo todo, atingindo além de seres humanos, várias espécies de mamíferos e aves. Uma vez que não há dados registrados no ministério da saúde sobre a genotipagem dos vírus entéricos envolvidos nos processos diarréicos na cidade de Manaus este trabalho vem colaborar para o conhecimento deste agente. METODOLOGIA Amostras de fezes: foram coletadas 1500 amostras de fezes nos hospitais públicos infantis da cidade de Manaus. Triagem das amostras: foram feitas pelo kit de Rotavírus por aglutinação de látex. Extração de RNA pelo método Trizol ®: Para este método, foi adaptado o protocolo original descrito por Chomczynski e colaboradores. O RNA foi suspenso em 30 μl de água Milli-Q autoclavada e estocado a – 20ºC. Eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA): A EGPA foi realizada para determinação dos eletroferótipos de rotavírus, segundo o procedimento descrito por Pereira e colaboradores. Reação em Cadeia da Polimerase precedida de Transcrição Reversa RT-PCR, para os genótipos G e P de rotavírus: Esta técnica foi desenvolvida conforme descrito por Gouvêa e colaboradores com modificações introduzidas por Leite e colaboradores, sendo realizadas em duas etapas. Nested-PCR: Após a obtenção dos produtos consensuais da RT-PCR, foi realizada a segunda etapa em Nested-PCR para a genotipagem do rotavírus. RESULTADO Foram positivas 213 amostras, equivalentes a 16% do total. Destas amostras, 20 apresentaram perfil longo e 130 apresentaram perfil curto, 63 não apareceram no PAGE. Neste estudo observamos uma prevalência menor dos genótipos G1[P8], G3[P8] ou G4[8] que no PAGE tem característica de perfil longo, enquanto os genótipos G2[P4] foram muito observados. CONCLUSÃO A importância deste estudo realizado com 1500 crianças em Manaus é que justamente está acontecendo 3 anos após a introdução da vacina. Através da análise do PAGE pudemos observar que prevavelmente o genótipo circulante hoje em Manaus é G2P[4] ou G2P[NT], já que estes são caracterizados por um eletroferotipo curto em PAGE. As observações feitas neste estudo são de suma importância para a vigilância epidemiológica feita em relação ao Rotavirus, para que saibamos os genótipos circulantes na região norte para que novas vacinas possam ser desenvolvidas.