25º Congresso Brasileiro de Microbiologia
ResumoID:1233-2


Área: Micologia Médica ( Divisão B )

IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DE LEVEDURAS DO GÊNERO CANDIDA

Elaine Patrícia Tavares do Espírito Santo (IEC); Karla Valéria Batista Lima (IEC); Silvia Helena Marques da Silva (IEC); Maurimelia Mesquita da Costa (IEC)

Resumo

Introdução: Leveduras do gênero Candida fazem parte da microbiota humana normal e podem estar envolvidas na etiologia de infecções graves. Testes micológicos apresentam limitações relacionadas ao número de espécies passíveis de identificação.

Objetivo: Avaliar a aplicabilidade da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para a identificação de espécies de Candida sp.

Material e Métodos: Foram avaliados 178 cultivos de leveduras obtidas de amostras clínicas diversas, cultivadas em ágar Sabouraud e Mycosel e identificadas em sistema automatizado ID 32C (bioMérieux). O DNA fúngico foi extraído utilizando fenol-clorofórmio-álcool isoamílico. Para PCR foram utilizados primers específicos para fungos ITS1 e ITS2, além dos primers específicos para C. albicans CA3 e CA4 que amplificam uma porção da região do ITS2 de C. albicans.

Resultados e Discussão: Das 178 amostras, 159 pertenciam ao gênero Candida e 19 a outros gêneros. Os produtos de PCR foram analisados em gel de poliacrilamida a 6% apresentando os seguintes fragmentos: C. albicans com os primers ITS1 e ITS2 apresentou o tamanho de 218 pb, com os primers CA3 e CA4 apresentou o tamanho de 110 pb, as demais espécies com os primers ITS1 e ITS2 apresentaram fragmentos de: C. parapsilosis (225 pb e 229 pb), C. tropicalis (218 pb), C. haemulonii (145 pb e 150 pb), C. sake (150 pb e 229 pb),  C. glabrata (482 pb), C. guilliermondii (248 pb), C. curvata (200 pb), C. melibiosica (140 pb), C. dubliniensis (218 pb), C. krusei (182 pb), C. intermedia (151 pb) e C. sphaerica (280 pb). A PCR apresentou sensibilidade de 95,6% e especificidade de 100%. A comparação estatística com o ID 32C evidenciou elevada concordância entre as técnicas analisadas (Kappa = 0,8226, p = 0,0001).

Conclusão: A PCR apresentou resultados confiáveis para identificação de espécies de Candida.


Palavras-chave:  Candida, Identificação Molecular, PCR