PRESENÇA DE BACILLUS SP PRODUTORES DE PROTEASES EM SOLO CONTAMINADO COM PETRÓLEO (IN VITRO)

Lorena Azevedo de Lima (UFAM); Larissa Ribeiro Ramos (UFAM); Raimundo Felipe Cruz Filho (UFAM); Januário Gama dos Santos (UFAM)

As proteases são encontradas em vários microrganismos, como vírus, bactérias, protozoários, leveduras e fungos. As proteases apresentam aplicações nas indústrias de alimentos, têxteis, farmacêuticas e de detergentes. A impossibilidade das proteases de plantas e animais atenderem à demanda mundial de enzimas têm levado a um interesse cada vez maior pelas proteases de origem microbiana. Os microrganismos representam uma excelente fonte de proteases devido a sua grande diversidade bioquímica e facilidade de manipulação genética, apresentando características desejadas na aplicação biotecnológica. Em função do exposto o objetivo deste trabalho foi determinar a atividade enzimática de Bacillus sp., isolados de amostras de solo contaminado com petróleo (in vitro). Nas amostras armazenadas em Becker contendo 1500 g de solo foram adicionados 75 mL de petróleo em superfície, a cada 7 dias foram realizadas coletas de solo para contagem de colônias por diluições sucessivas até 10^-5, inoculadas em PCA e incubados a 37 ^oC/24h. As colônias que apresentaram crescimento foram semeadas em ágar gelatina/leite e as que apresentaram halo de contraste com o meio foram selecionadas utilizado o método qualitativo de Pz. Posteriormente o extrato bruto das bactérias com Pz inferior 0,5 foram submetidas à análise enzimática quantitativa. Para a análise enzimática quantitativa a reação foi formulada com azocaseína (1,0%), posteriormente incubados  a 37 º C/1h. Foi utilizado ácido tricloacético 10 % (p/v) para interromper a ração. Com a total precipitação do substrato não hidrolisado, o remanescente foi removido por centrifugação e o sobrenadante foi retirado para realizar leitura espectrofotométrica a 440 nm. As identificações bacterianas foram pelas características morfofisiológicas. Os resultados obtidos indicam que 100% das amostras isoladas eram Bacillus sp., com produção enzimática entre 0,07 a 8,25 U/mL, demonstrando que estes microrganismos possuem potencial proteolítico para serem utilizados em processos na bioindústria.