IDENTIFICAÇÃO E TIPAGEM MOLECULAR DE CEPAS CLÍNICAS E AMBIENTAIS DE COCCIDIOIDES SPP DO ESTADO DO PIAUÍ, BRASIL

Cláudia de Carvalho Falci Bezerra (FIOCRUZ/IPEC); Regina Célia Lima de Macêdo (FIOCRUZ/IPEC); Glaucia Gonçalves Barbosa (FIOCRUZ/IPEC); Luciana Trilles (FIOCRUZ/IPEC); Cíntia de Moraes Borba (FIOCRUZ/IOC); Márcia dos Santos Lazéra (FIOCRUZ/IPEC); Bodo Wanke (FIOCRUZ/IPEC)

Coccidioidomicose é micose sistêmica causada por duas espécies do gênero Coccidioides, adquirida através da inalação de propágulos fúngicos que podem causar infecção pulmonar e disseminar para outros órgãos como pele, ossos e SNC. No Brasil, a micose causada pela espécie C. posadasii é observada no semi-árido do Nordeste. Em parasitismo, expressa forma característica em esférula, repleta de endósporos e em saprofitismo possui aspecto filamentoso com hifas hialinas formando artroconídios, aspecto comum a numerosos fungos. Por ser seu agente um microrganismo patogênico altamente infectante (risco 3), é importante implantar uma técnica de identificação molecular que minimize os riscos de manipulação do operador, assim como importa conhecer a variabilidade molecular deste fungo no Brasil. Em 1995 foi caracterizado um antígeno de 19 kDa de Coccidioides spp. e foram testados primers baseados na seqüência do gene CSA, específico para este fungo. Objetivos do estudo: confirmar, por meio de marcador molecular específico (gene CSA), o gênero e analisar a variabilidade molecular de cepas brasileiras de C. posadasii. através da utilização do primer universal M13. Estamos estudando 65 isolados clínicos e ambientais deste fungo, identificados anteriormente pela técnica clássica de inoculação animal e preservados na Coleção de Cultura do IPEC-FIOCRUZ. Para identificação do gênero utilizamos um par de primers específicos (Ci 1 – 5´ AAG TTC TCA CTC CTC AGC GCT ATC G 3´ e Ci 2 – 5´ ACA TTA AGG TTC CTC CCC TTC AAC C 3´) que codificam o gene CSA, específico do fungo. A variabilidade molecular está sendo analisada com primer universal M13 (5' GAGGGTGGCGGTTCT 3') utilizando-se o módulo 1D de análise de gel (BioGalaxy, BioAware, Hannut, Belgium), na versão 7.5.30 do BioloMICS (BioAware). Resultados: Dos 65 isolados, 59 se mostraram positivos (90,76%) para o gene CSA e dados preliminares do estudo da variabilidade molecular serão apresentados.