Os polissacarídios e peptidopolissacarídios são polímeros envolvidas
na arquitetura da parede celular. Além disso, representam importantes moléculas
antigênicas relacionadas com a patogênese de diversos fungos. No estudo da
parede celular de Aspergillus fumigatus,
foi possível isolar peptidopolissacarídios enriquecidos em manose e galactose,
denominados peptidogalactomananas (pGMs), que apresentavam intensa reatividade
com soro de pacientes que apresentavam aspergiloma ou ABPA.
Neste trabalho,
foram estudados peptidopolissacarídios extraídos de micélio de Cladosporium herbarum, ascomiceto
relacionado ao desenvolvimento de doenças alérgico-respiratórias em humanos.
Após fracionamento por Cetavlon, o precipitado obtido foi analisado, sendo
possível constatar que era constituído majoritariamente por açúcares (cerca 76%
de açúcar e 18% de proteína), característico de peptidopolissacarídios. As
moléculas foram separadas por eletroforese em SDS-PAGE, apresentando duas
bandas predominantes de peso molecular igual a 44 e 47kDa.A composição de monossacarídios também foi
avaliada, revelando a predominância de galactose e manose (proporção de 48:45,
respectivamente), sugerindo a presença de uma pGM. A pGM de C. herbarum foi submetida ao
fracionamento em coluna de troca iônica SOURCE 30Q (Pharmacia AP, Suécia)
eluida com gradiente descontínuo de NaCl
0,2 a 1,0M em tampão fosfato 0,01M, pH 7,0 , resultando em duas frações (FI e
FII). Após analise do perfil protéico de FI e FII, foi possível concluir que FI
era uma fração purificada das proteínas de 44 e 47kDa. Finalmente, foi
observada a imunorreatividade dessas moléculas nos diversos estágios de
purificação (glicoproteína bruta, pGM, FI e FII) com anti-soro de coelho
anti-células totais de A. fumigatus,
sugerindo que as pGMs extraídas desses dois micro-organismos apresentam
epítopos conservados. A hipótese de reação cruzada entre as pGMs dos dois
fungos foi sustentada, uma vez que a pGM de C.
herbarum se mostrou reativa quanto testada contra soro de 14 pacientescom aspergilose.