SUSCETIBILIDADE ANTIFÚNGICA DE CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS E C. GATTII POR CITOMETRIA DE FLUXO.

Bernardina Penarrieta Morales (FIOCRUZ); Luciana Trilles (FIOCRUZ); Ivan Neves Jr. (FIOCRUZ); Marília Martins Nishikawa (FIOCRUZ); Raquel de Vasconcellos C. de Oliveira (FIOCRUZ); Mônica dos Santos Elias (FIOCRUZ); Wallace Raimundo A dos Santos (UFPA); Solange Ps Evangelista Costa (UFPA); Bodo Wanke (FIOCRUZ); Márcia dos Santos Lazéra (FIOCRUZ)

A criptococose é micose sistêmica causada por duas espécies de leveduras do grupo dos basidiomicetos, Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. C. neoformans é cosmopolita e afeta principalmente hospedeiros imunodeprimidos. C. gattii é a principal causa de meningite e pneumonia fúngica em hospedeiros imunocompetentes. Com o objetivo de reduzir o tempo de incubação, utilizar leitura automatizada, obter resultados rápidos e reprodutíveis para teste de suscetibilidade in vitro, a concentração inibitória mínima (CIM) de 20 isolados de C. neoformans e 21 de C. gattii foram determinados por citometria de fluxo e os resultados comparados com o protocolo padrão proposto pelo CLSI/M27A-2. Após 2 horas de incubação com anfotericina B utilizando FUN-1: C.gattii, resulta em 100% de concordância para diluição de 2µg/ml e 95,2% para 1µg/m e C.neoformans com concordância de 100% para 1 e 2µg/ml. Para azólicos e flucitosina foram obtidos resultados reprodutíveis com fluorocromo Acridine Orange após 18 horas de incubação que resultou em 78% de concordância para fluconazol, 85% para itraconazol e 97% para flucitosina. No método de microdiluição, C. gattii foi menos suscetível do que C. neoformans (p<0,05) frente a itraconazol e flucitosina. Na citometria de fluxo, C. gattii foi menos suscetível do que C. neoformans (p<0,05) frente a fluconazol e flucitosina. Na verificação de diferenças entre os métodos, independente da espécie, foi encontrada diferença entre as CIMs com itraconazol (p=0,006) e anfotericina B (p=0,003). Não foram encontradas diferenças significativas entre os valores de CIMs para fluconazol (p= 0,173) e flucitosina (p=0,174). A citometria de fluxo é uma ferramenta útil, com potencial para testes in vitro e determinar a CIM de anfotericina B, fluconazol, itraconazol, e flucitosina. Observamos a redução do tempo mínimo para obtenção de resultados, uma vez que o protocolo NCCLS/CLSI M27A-2 prevê o tempo de 72 horas para estes fungos.