CARACTERIZAÇÃO DE MICOBACTÉRIAS DE CRESCIMENTO RÁPIDO DE UM SURTO EM CIRURGIAS E REVISÃO DA TAXONOMIA DOS MEMBROS DO GRUPO MYCOBACTERIUM CHELONAE-ABSCESSUS

Cristina Viana Niero (Unifesp); Cristianne Kayoko Matsumoto (Unifesp); Karla Valéria Batista Lima (IEC); Maria Luiza Lopes (IEC); Moises Palaci (UFES); Rafael Silva Duarte (UFRJ); Maria Cristina Silva Lourenço (IEC); Andre Kipnis (UFGO); Marta Osorio Ribeiro (LACEN-RS); Sylvia Cardoso Leão (Unifesp); Maria Jesus Garcia (UAM); Maria Carmem Menendez (UAM); Erica Chimara (IAL)

Um surto de infecções por micobactérias em procedimentos invasivos ocorreu no Brasil entre 2004 e 2008. Um total de 152 isolados cirúrgicos provenientes de sete estados brasileiros foi estudado. Os isolados eram micobactérias de crescimento rápido acromógenas, que apresentaram o perfil M. abscessus 2 pela técnica molecular PRA-hsp65. A clonalidade dos isolados foi confirmada por PFGE usando duas enzimas, DraI e AseI, mostrando que as infecções nos diferentes estados foram causadas por uma única cepa. A identificação da espécie causadora do surto foi obtida por análise das sequências dos genes rpoB (fragmento V) e hsp65 (fragmento de Telenti). De acordo com a maior similaridade de sequências (99.72% e 100%, respectivamente), os isolados foram identificados como Mycobacterium massiliense, pertencente ao grupo Mycobacterium chelonae-abscessus. Entretanto, os índices de similaridade com as sequências de rpoB e hsp65 depositadas de outra espécie de micobactéria do mesmo grupo, M. boletii, também foram elevados (98.45% e 99.25%, respectivamente) e superiores ao ponte de corte aceito para separação inter-espécie (3%), levando a resultados de identificação conflitantes. Para resolver este conflito três isolados clínicos provenientes deste surto e cinco cepas tipo dos membros do grupo M.chelonae-abscessus - M. abscessus, M. chelonae, M. immunogenum, M. massiliense e M. boletii foram caracterizados por hibridação DNA-DNA e RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) do gene 16S rRNA, que são métodos de referência para definição de espécie em micobactérias. Resultados de hibridação DNA-DNA (>70% de similaridade) confirmaram que os isolados do surto e as cepas tipo de M. abscessus, M. massiliense e M. boletii são relacionadas geneticamente e os padrões de RFLP-16S rRNA também foram indistinguíveis. M. chelonae e M. immunogenum apresentaram resultados distintos de PRA-hsp65, sequenciamento dos genes rpoB e hsp65, hibridação DNA-DNA e RFLP-16S. A análise conjunta destes resultados indicou que M. abscessus, M. massiliense e M. boletii representam uma única espécie. Duas subespécies foram propostas, M. abscessus subsp. abscessus e M. abscessus subsp. massiliense que podem ser distinguidas por PRA-hsp65, com diferença em uma única banda após digestão com a enzima HaeIII, e por diferenças nas sequencias dos genes rpoB (3.4%) e hsp65 (1.3%).