| Área: Ecologia Microbiana ( Divisão I )
ESTRUTURA DA COMUNIDADE E ISOLAMENTO DE PSEUDOMONAS SPP. EM MANGUEZAIS DA BAÍA DE TODOS OS SANTOS-BA
Deborah Catharine de Assis Leite (UEFS); Suikinai Nobre Santos (EMBRAPA MEIO AMBIENT); Patricia Oliveira dos Santos (UFRB); Armando Cavalcante Franco Dias (EMBRAPA MEIO AMBIENT); Fernando Dini Andreote (EMBRAPA MEIO AMBIENT); Itamar Soares de Melo (EMBRAPA MEIO AMBIENT); Milton Ricardo de Abreu Roque (UFBA)
ResumoOs microrganismos
representam a forma de vida mais abundante e diversificada no planeta;
e no solo, esta diversidade é extremamente elevada. Grande ênfase
tem sido dada ao estudo do gênero Pseudomonas por representar um grupo
funcional importante no solo e extremamente versátil, frequentemente
associados à ambientes extremos e contaminados. Espécies do gênero
Pseudomonas são abundantes em solos de manguezais. Este trabalho teve
como objetivo o isolamento de estirpes de Pseudomonas
spp. e observar a estrutura de comunidades destas
em sedimentos de manguezal com histórico de contaminação por petróleo,
nos municípios de Madre de Deus e Santo Amaro - Baía de Todos os Santos–Ba.
Foram coletados
solos de 4 pontos da Baia de Todos os Santos: Caípe, Acupe, Saupe e
São Brás; e em cada estação de coletada foram feitas amostras compostas
de 5 sub-mostras em duplicatas (0-10cm). As amostras (10 g) foram enriquecidas
em 90 mL de caldo King´s B e submetidas à agitação (180 rpm / 30
°C / 48h). Depois foram feitas diluições em série e a partir das
diluições 10-2 e 10-3 foram inoculadas Pseudomonas
Isolation Agar Base com glicerol 2% (30 °C / 48h). A contagem do número
de unidades formadoras de colônias (UFC/g de solo) foi realizada e
as placas que apresentaram 30 a 300 colônias, foram utilizadas para
o isolamento das colônias com diferenças macromorfológicas. As estirpes
obtidas tiveram seu DNA genômico extraído e a região 16S do rDNA
amplificada usando o par de iniciadores fD1/rP2. Os amplicons obtidos
foram seqüenciados, e as sequências obtidas foram submetidas no BLASTn
do NCBI.
A estrutura
da comunidade de Pseudomonas foi analisada por meio da técnica
de PCR/DGGE, com a utilização do par de iniciadores PsF/PsR. As estirpes
selecionadas foram identificadas como P. mendocina, P. stutzeri
e P. putida, sendo linhagens relacionadas à degradação de
compostos recalcitrantes provenientes da indústria petrolífera.
P.putida foi isolada em todos os pontos de coleta.
A análise por DGGE revelou que réplicas foram homogêneas, e que há
diferenças significativas na estrutura de comunidades nos pontos amostrados.
Foi observada a formação dois agrupamentos bastante distintos, um
deles apenas com Caípe e o outro contendo as demais áreas. Foram encontradas
UTOS de ocorrência em todos os pontos amostrados, podendo sinalizar
que são espécies dominantes, submetidos a diferentes graus de contaminação
por derivados de petróleo.
Palavras-chave: Pseudomonas, BTS, DGGE |