EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DE AMOSTRAS DE SHIGELLA ISOLADAS DE CRIANÇAS COM DIARRÉIA NA CIDADE DE MANAUS- AM.

Paula Taquita Serra (UEA); Leidiane Amorim Soares (CpQLMD-FIOCRUZ); Luis André Mariúba (CpQLMD-FIOCRUZ); Dayane Martins Serfaty (UEA); Raquel Oliveira Pessoa (UEA); Luciana Pereira Sousa (CpQLMD-FIOCRUZ); Maria Edilene Martins Almeida (UEA); Yuri Oliveira Chaves (UEA); Patrícia Puccinelli Orlandi Nogueira (CpQLMD-FIOCRUZ)

Introdução O diagnóstico de shigelose é feito pelo isolamento dos microorganismos em meios de cultura seguido de identificação bioquímica e reações de aglutinação com anti-soros específicos. Um dos testes moleculares mais utilizados, é a amplificação por PCR do gene ipaH que é responsável por uma proteína localizada no flagelo e que está presente em todas as espécies de Shigella. Diante do exposto, investigamos a prevalência dos sorotipos de Shigella em crianças com diarréia aguda atendidas em Manaus, detectando os fatores de virulência e avaliando os dados clínicos e epidemiológicos associados a este patógeno. Este estudo é inédito na região do Amazonas. Materiais e métodos Identificação clássica e bioquímica - As amostras foram identificadas em galeria Bioquímica de Citrato, TSI, EPM e Mili. Teste de sensibilidade a antimicrobianos - Para o antibiograma, a técnica utilizada foi descrita por Bauer e colaboradores (1996). Extração de DNA plasmidial - foi feita através da lise alcalina descrita por Maniatis e colaboradores, 1989 Técnica de PCR - Foi realizada através de reação de PCR, utilizando primers para a detecção dos genes IpaH, IpaBCD, Einv e Evt. Sorologia – Foram realizados anti-soros polivalentes espécie – específicos procedentes da PROMICRO. Resultados e Discussão Os testes sorológicos mostraram a Shigella flexneri sendo a mais freqüente (32%) seguida pela S. sonnei (26%), S. dysenteriae (14%) e S. boydii (8%). Os resultados obtidos condizem com o observado nas demais localidades do Brasil, com a predominância de Shigella flexneri. Os genes IpaH e IpaBCD são essenciais para que a bactéria possa atravessar as células M e cumprir seu perfil invasivo. Das 50 amostras, 30 foram positivas para o gene IpaH , 28 para o IpaBCD, 28 para o Einv e 3 para o Evt. As amostras foram testadas quanto a nove antibióticos. Todas foram resistentes a Nalidixico Ac. e Clorafenicol, 98% foram resistentes a Kanamicina, 96% a Tetraciclina e Gentamicina, 90% a Ampicilina, 72% a Amoxilina + Ac. Clavulânico, 40% a Ciprofloxacino e 32% a Ceftriaxona. O teste mostrou que a terapia antimicrobiana utilizada nos hospitais é ineficaz. Disto isto, um antibiograma seria necessário antes da administração dos antibióticos. No trabalho realizado, pode-se observar a presença de plasmídeo de resistência em 22 amostras. Financiamento: FAPEAM, CNPq