ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA E MOLECULAR DE FLAVOBACTERIUM COLUMNARE DE TRÊS ESPÉCIES DE PEIXES TROPICAIS NO BRASIL

Fernanda de Alexandre Sebastião (UNESP); Fabiana Pilarski (UNESP); Manoel Victor Franco Lemos (UNESP)

As bactérias são organismos que possuem grande importância na piscicultura pelas doenças que provocam, gerando impacto econômico apreciável. As taxas de mortalidade em peixes são por vezes elevadas, especialmente em situações de estresse dos hospedeiros. Dentre as enfermidades de etiologia bacteriana em sistemas de criação intensiva destaca-se a <i>Flavobacterium</i> <i>columnare</i>, agente etiológico da columnariose, bacteriose descrita para numerosos hospedeiros, tendo uma vasta distribuição geográfica. O objetivo deste estudo foi o isolamento e a caracterização bioquímica e por PCR-RFLP do gene 16S rRNA de <i>F.</i> <i>columnare</i> em peixes tropicais no Brasil, buscando uma forma de diagnóstico mais rápida.Tilápia (<i>Oreochromis</i> <i>niloticus</i> ), tambaqui (<i>Colossoma</i> <i>macropomum</i> ) e matrinxã (<i>Brycon</i> <i>cephalus</i>) foram examinados externamente quanto aos sinais clínicos característicos de columnariose, como manchas acinzentadas na cabeça, região dorsal e pedúnculo caudal dos peixes. A amostragem compreendeu a coleta de 18 exemplares de peixes das três espécies citadas. Para o isolamento, uma raspagem com swab estéril foi realizada nas lesões e também no rim cefálico dos peixes clinicamente diagnosticados como acometidos de columnariose e imediatamente semeados em meios de cultura (líquido e sólido) próprios para <i>Flavobacterium</i>. Em meio líquido, houve o desenvolvimento de bacilos finos, longos, móveis por deslizamento e Gram negativos. Em meio sólido, as colônias demonstraram-se pequenas, de coloração creme, irregulares e com bordas em forma de raiz. Ao todo foram obtidos 37 isolados: 21 provenientes de <i>Colossoma</i> <i>macropomum</i>, 08 de <i>Oreochromis</i> <i>niloticus</i> e 08 de <i>Brycon</i> <i>cephalus</i>. A caracterização bioquímica das amostras, como absorção do vermelho Congo, produção de flexirrubina, produção de H₂S, redução do nitrato e motilidade sugere que os isolados podem ser classificados como <i>Flavobacterium </i>  <i>columnare</i>. Os novos isolados apresentam um padrão de bandas gerado pelo corte das cinco enzimas avaliadas (HpaII, HhaI, MboI, PstI e EcoRI) idêntico ao de duas cepas padrão de <i>F.</i> <i>columnare</i>. Portanto, a utilização da PCR-RFLP para identificação da bactéria apresentou-se como uma ferramenta eficiente e mais rápida do que as técnicas bioquímicas atuais que são demoradas e geralmente não conclusivas.