EFEITO DA DESNUTRIÇÃO NEONATAL SOBRE A PRODUÇÃO DE ÓXIDO NÍTRICO EM MACRÓFAGOS ALVEOLARES DE RATOS INFECTADOS, IN VITRO, COM STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE OU SENSÍVEL A METICILINA

Natália Gomes Morais (MedTrop); Thacianna Barreto Costa (MedTrop); Maiara Santos Severo (UFPE); Célia Maria Machado Barbosa Castro (UFPE)

Objetivo: Estudar em ratos nutridos (N) ou submetidos à desnutrição neonatal (D), a produção de óxido nítrico (ON) por macrófagos alveolares infectados, in vitro, com Staphylococcus aureus meticilina-resistente (MRSA) ou meticilina-sensível (MSSA). Métodos e Resultados: Ratos machos Wistar (n=12) foram divididos em dois grupos distintos, de acordo com a dieta utilizada: D (ratos amamentados por mães submetidas à dieta nutricionalmente deficiente com 8% de caseína) e N (ratos amamentados por mães submetidas à dieta com 17% de caseína). Após o período de amamentação, os animais foram submetidos a um longo período de reposição nutricional, com Labina. Os macrófagos alveolares (MA) foram coletados através da técnica do lavado broncoalveolar (LBA), após traqueostomia. Alíquotas de três mL de salina a 0,9% foram injetadas, aspiradas e coletadas até obter-se um volume final de 30 mL de LBA por animal. O isolamento dos MA foi realizado por adesão em placas tipo Falcon, sendo distribuídos na proporção de 10⁶ células/mL de meio de cultura RPMI. Após a adição ou não de 100µL de suspensão bacteriana padronizada em espectrofotômetro, filtro-570nm (densidade óptica de 0.15, equivalente a 10^-6 CFUmL^-1), as placas foram divididas em 3 sistemas: controle (C), MSSA (ATCC 29213) e MRSA (ATCC 33591). Para a produção de ON, as culturas foram mantidas em estufa a 37°C por 2h. A quantificação desse radical livre baseou-se na reação de Griess, através da determinação da concentração de nitratos/nitritos nos sobrenadantes das culturas. A leitura foi realizada em leitor de ELISA, filtro-550nm. Utilizou-se teste t-Student, admitindo-se nível de significância de 5%. Resultados: Não houve diferença significativa ao comparar a produção de ON entre os sistemas de cada grupo (N-C 1,36±0,69 µM/mL, N-MSSA 1,48±0,71 µM/mL e N-MRSA 1,41±0,70 µM/mL) e (D-C 0,89±0,54 µM/mL, D-MSSA 0,84±0,62 µM/mL e D-MRSA 0,86±0,37 µM/mL). Entretanto, a liberação de ON foi diminuída no grupo D, quando comparado com o grupo N em todos os sistemas, com p<0,05. Conclusão: Ambas as cepas foram capazes de manter a produção de ON similar à concentração do controle. O modelo de desnutrição neonatal adotado promoveu alteração da função das células fagocitárias, comprometendo o estresse nitrosativo dos macrófagos alveolares.