| Área: Microbiologia Clinica ( Divisão A ) DETECÇÃO DA PRODUÇÃO DE CARBAPENEMASES EM KLEBSIELLA PNEUMONIAE PELO TESTE DE HODGE MODIFICADO: ATENÇÃO AOS RESULTADOS FALSO-POSITIVOS!
Cecilia Godoy Carvalhaes (UNIFESP); Renata Picão (UNIFESP); Adriana Nicoletti (UNIFESP); Danilo Elias Xavier (UNIFESP); Ana Cristina Gales (UNIFESP)
ResumoAs altas taxas de produção de b-lactamases de espetro estendido (ESBL) torna a classe dos carbapenens a principal opção terapêutica para infecções causadas por Klebsiella pneumoniae (KPN). A produção de carbapenemases, em destaque a K. pneumoniae carbapenemase (KPC), tem sido relatada nesta espécie, assim como a resistência aos carbapenens decorrente da produção de b-lactamases tipo ESBL e/ou AmpC associada a perda de porinas. Em 2009, o Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI) publicou recomendação para detecção de carbapenemases através do teste de Hodge modificado (MHT) em isolados com concentração inibitória mínima (CIM) elevada ou zona de inibição reduzida aos carbapenens.
28 isolados clínicos de KPN que atendiam aos critérios do CLSI (M100-S19) para realização do MHT foram avaliados para a presença de carbapenemases e acurácia do MHT. A CIM para antimicrobianos foi determinada por ágar diluição. MHT foi realizado com inóculo padrão (IP) e com alto inóculo (AI) da cepa teste. A hidrólise de carbapenens foi determinada por ensaio espectrofotométrico. A pesquisa dos genes que codificam KPC, CTX-M, GES, AmpC plasmidial, metalo-b-lactamase e OXA, assim como alterações nas proteínas de membrana externa (OMP) OmpK35 e OmpK36 foram realizadas por PCR.
A CIM 50 para cefepime, ceftazidima, imipenem, meropenem e ertapenem foi de 32, >64, 2, 4 e 16 mg/mL, respectivamente. O MHT usando IP detectou 25% (n=7) e 21% (n=6) de isolados como produtores de carbapenemases, pelos discos de ertapenem e meropenem, sendo que o mesmo teste com AI detectou 54% (n=15) e 43% (n=12) das amostras, respectivamente. Nenhuma atividade hidrolítica aos carbapenens foi observada. blaCTX-M foi detectada em 27 (96%) isolados, dos quais 2 também carreavam blaGES. 24 isolados (86%) apresentaram amplicons com alterações em pelo menos um gene de OMP. Não foi detectada a presença de nenhum outro gene pesquisado.
A ocorrência de falso-positivos pelo MHT foi observada provavelmente devido à associação de perda de porina e produção de ESBL, em concordância com outros estudos. Esta hipótese é reforçada pelo aumento de resultados falso-positivos relacionados ao aumento do inoculo da cepa teste ATCC 25922. Os laboratórios clínicos precisam estar atentos que resultados falso-positivos podem ocorrer, especialmente em áreas onde há alta prevalência de isolados produtores de ESBL.
Palavras-chave: Klebsiella pneumoniae, teste de Hodge modificado, carbapenemases |