SELEÇÃO DE LINHAGENS DE BACILLUS ISOLADAS DE MANGUEZAL PARA A PRODUÇÃO DE ANTIFÚNGICOS

Raphaela Vasconcelos Gomes Barreto (UFC); Luína Benevides Lima (UFC); Vânia Maria Maciel Melo (UFC)

A crescente demanda mundial pela produção de alimentos trouxe consigo o aumento do uso de agrotóxicos, a seleção de fitopatógenos e o acúmulo de substâncias tóxicas nos alimentos. O maior desafio da agricultura mundial ainda é a busca por alternativas ao uso de agrotóxicos. Neste contexto, o biocontrole surge como a alternativa mais promissora, sendo linhagens de Agrobacterium, Bacillus e Pseudomonas as mais estudadas para esta finalidade. Com este enfoque, o presente trabalho pesquisou a produção de antifúngicos por linhagens de Bacillus isoladas do solo do manguezal do Rio Jaguaribe-CE. Os ensaios foram realizados cultivando as bactérias na presença de fungos dos gêneros Aspergillus, Penicillium e Mucor. Adicionalmente foi realizada a pesquisa dos genes lpa14 e ituD, responsáveis pela produção de iturina A, um potente antifúngico produzido por Bacillus. Os ensaios consistiram no cultivo simultâneo da bactéria e do fungo em meio composto pela mistura de Agar Sabouraund e Agar Nutritivo (1:1, v/v). O inóculo de cada bactéria foi feito em paralelo ao inóculo do fungo e as culturas foram incubadas por seis dias a 30 ºC. A inibição do crescimento do fungo foi usado como indicativo da produção de substâncias antifúngicas. Para a pesquisa de iturina, o DNA genômico das linhagens de bactérias foi amplificado simultaneamente com os pares de iniciadores ituD-F e ituD-R e lpa-14F e lpa-14R. A amplificação ocorreu com desnaturação a 94 ºC por 30 s; seguido de 30 ciclos a 94 ºC por 1 min; 50 ºC por 1 min e 72 °C por 1,5 min; e extensão a 72 °C por 10 min. Os produtos de PCR foram visualizados através de eletroforese em gel de agarose 1%. Das 30 linhagens analisadas por PCR, apenas uma foi confirmada como produtora de iturina. Esta linhagem inibiu de forma significativa o crescimento das três espécies de fungos testados. Treze linhagens inibiram o crescimento de Aspergillus niger e 20 inibiram Penicillium herguei, demonstrando a produção de diferentes antibióticos por essas linhagens de bactérias. Os resultados obtidos com este trabalho ressaltam a importância de se explorar o solo de manguezais em busca de novos genes ou linhagens de bactérias aplicáveis ao controle de fitopatógenos.