FUNGOS NEGROS NA BIORREMEDIAÇÃO DE SOLOS CONTAMINADOS POR HIDROCARBONETOS

Derlene Attili de Angelis (UNESP); Dejanira de Franceschi de Angelis (UNESP); Vânia Aparecida Vicente (UFPR); Fernando Carlos Pagnocca (UNESP)

Nos microrganismos encontra-se uma grande possibilidade de solução para os problemas causados pela presença de substâncias orgânicas tóxicas no ambiente. Estudos confirmam o potencial de degradação das espécies fúngicas para este fim. O benzeno, presente no petróleo, constitui-se em um hidrocarboneto mono-aromático, poluente de alta prioridade pelos riscos que apresenta aos seres vivos. Assim, um fungo capaz de mineralizar o mesmo possui grande aplicação em tecnologias de biorremediação e biofiltração. A assimilação de benzeno por alguns fungos negros foi demonstrada uma década atrás. Esta pesquisa objetivou isolar este grupo de fungos a partir de solos contaminados e testar sua capacidade de degradação do benzeno para futura aplicação biotecnológica. Quatro locais com diferentes históricos de contaminação por petróleo foram amostrados. O solo foi tratado pela técnica de flotação em óleo mineral, onde se dilui 10g do mesmo em 100mL de solução salina contendo antibióticos. Alíquotas foram inoculadas em Ágar Mycosel e incubadas a 30^oC, até o aparecimento de culturas negras. Estas foram então purificadas e transferidas para Ágar Malte 2%, preservadas em tubo de cultura inclinado a 10^oC e por ultra-congelamento a -80^oC. A identificação foi realizada por sequenciamento do DNA ribossomal. Realizaram-se os testes de biodegradação com o corante 2,6-diclorofenol indofenol (descoloração do meio), e com o auxílio de um espectrofotômetro Bioscreen C (Labsystems, Helsinki, Finlândia), para observação da curva de crescimento. Benzeno foi utilizado como única fonte de C. Cerca de 350 estirpes foram isoladas. Até o momento, 4 culturas de fungos negros demonstraram melhores resultados na assimilação de benzeno 1%: duas espécies de Exophiala e duas de Cladophialophora. Este resultado mostrou que não apenas os hidrocarbonetos alifáticos suportam o crescimento dos fungos melanizados, mas também os aromáticos. As curvas de crescimento das cepas testadas mostraram que as culturas desenvolveram-se bem do 2^o dia até 72h. Antes disso, os fungos parecem estar se adaptando ao sistema, sofrendo uma queda inicial no número de células. A partir de então, apresentam um pico de crescimento e depois estabilizam até sofrerem um novo declínio.