DIVERSIDADE BACTERIANA DE ROCHA PETROLÍFERA DE SUB-SUPERFÍCIE LOCALIZADA EM ÁGUAS ULTRA-PROFUNDAS NA BACIA DO ESPÍRITO SANTO, BRASIL

Elisa Korenblum (UFRJ); Érika Valoni (Petrobras); Marcia Reed R. Coelho (UFRJ); Diogo Jurelevicius (UFRJ); Gina Vasquez Sebastián (Petrobras); Lucy Seldin (UFRJ)

Reservatórios de petróleo de sub-superfície representam um ambiente singular devido às características de alta concentração de óleo e baixa concentração de biomassa. Além destas peculiaridades, a obtenção de amostras é altamente limitante devido à tecnologia que deve ser empregada, chamada de testemunhagem. Neste estudo foram coletadas testemunhos de rocha com 3.823,9 m (TA) a 3.829,70 m (TB) de profundidade abaixo do fundo do mar, de um campo de petróleo virgem localizado em águas ultra-profundas na Bacia do Espírito Santo. O procedimento de amostragem, feito de forma asséptica, foi realizado durante as operações de perfuração e testemunhagem realizadas pela Petrobras, através de técnicas pioneiras de exploração de campos offshore. Este trabalho teve como objetivo caracterizar molecularmente a comunidade bacteriana cultivável presente nas rochas. Amostras de rocha petrolífera (5g) foram utilizadas para crescimento em meio BANHT e meio Postgate E, e foram incubadas por 60 dias em anaerobiose. Para avaliação da comunidade bacteriana presente nos cultivos, 10 ml do crescimento foram processados para extração de DNA e subseqüente amplificação do gene que codifica o RNAr 16S e construção de biblioteca de clones. Quatro bibliotecas foram obtidas (aprox. 40 clones cada), e os clones foram identificados utilizando a ferramenta blastn. Em todas as bibliotecas, predominaram seqüências relacionadas a bactérias pertencentes ao filo Firmicutes. No cultivo em meio BANHT, os testemunhos TA e TB apresentaram 100% de clones relacionados ao gênero Bacillus, sendo que em TA a espécie B. cereus mostrou-se predominante (95,5%), enquanto que em TB todos os clones foram relacionados à espécie B. licheniformis. As bibliotecas originadas das culturas em meio Postgate E apresentaram, em TA, clones relacionados aos gêneros Clostridiisalibacter (50%) e Staphylococcus (12,5%), e 37,5% à espécie B. firmus. Em TB, todas as seqüências mostraram-se relacionadas ao gênero Bacillus: B. licheniformis (54,2%); B. firmus (29,2%); B. shackletonii (8,3%); e B. subtilis (8,3%). Estes resultados são semelhantes a trabalhos anteriores que mostram que algumas espécies dos gêneros encontrados no presente trabalho também foram identificadas em amostras de rochas petrolíferas de campos e de solos vulcânicos de sub-superfície. Os gêneros Clostridiisalibacter e Bacillus apresentam uma vantagem adaptativa e de sobrevivência em ambientes extremos devido à capacidade de formação de esporos.