SÍNTESE DE ÉSTERES METÍLICOS POR TRANSESTERIFICAÇÃO ENZIMÁTICA UTILIZANDO LIPASE DE FUSARIUM SP. ISOLADO DA MATA ATLÂNTICA.

Bruno Henrique de Oliveira (UNESP); Thaís Yumi Shinya (UNESP); Valéria Marta Gomes de Lima (UNESP)

Lipases são responsáveis pela hidrólise de acilgliceróis de cadeia longa e também são capazes de catalisar outros tipos de reações, como transesterificação, em ambientes aquo-restritos. Biodiesel tem surgido como uma alternativa atraente ao petróleo e sua produção depende de catalisadores químicos que criam inconvenientes de poluição e alta exigência energética. As lipases podem ser uma alternativa à catálise química por atuarem em condições brandas e liberar glicerol com alto grau de pureza como subproduto. O objetivo do projeto foi estudar a capacidade de transesterificação da lipase produzida por Fusarium sp. isolado da Mata Atlântica. O microrganismo foi cultivado em fermentação submersa em meio contendo óleo de oliva 1% (m/v), Tween 80 1,5% (m/v) e extrato de levedura 0,5% (m/v), a 180rpm por 72h a 29°C, as células foram separadas por filtração e o sobrenadante liofilizado a -80°C por 20h. Foram estudados dois sistemas de transesterificação: palmitato de p-nitrofenila (pNPP) e metanol ou óleo de soja e metanol. A primeira metodologia utilizou 170mg de lipase liofilizada, 10mL de pNPP (10mM em hexano), iniciando a reação com adição de 60µL de metanol. Incubada sob agitação orbital de 250rpm, 28°C por 1h. Após o tempo de reação, 1mL do mistura foi adicionado a 1mL de NaOH 0,1M e a fase aquosa lida a 412nm contra um branco sem enzima. Uma unidade de atividade enzimática foi definida como a liberação de 1µmol.min^-1.g^-1 de p-nitrofenol. A segunda metodologia foi realizada em Erlenmeyer de 50mL contendo óleo de soja (5g), razão molar óleo-metanol (3:1) e lipase (0,2g) a 180rpm e 28°C. A conversão de triacilgliceróis a ésteres metílicos foi acompanhada por cromatografia de camada delgada (CCD) utilizando éter de petróleo, éter etílico e ácido acético (80:19:1) como fase móvel e atmosfera de iodo para revelação. Após 1h de reação frente ao pNPP e metanol observou-se atividade de 0,52U.g^-1. Acompanhando a transesterificação do óleo de soja por CCD, verificou-se aumento crescente da formação de éster metílico com o tempo, com o máximo em 24h. Os resultados obtidos sugerem que a lipase produzida por Fusarium sp. pode ser utilizada como biocatalisador de baixo custo para produção de biodiesel a partir de óleo de soja e inconvenientes envolvidos no processo químico podem ser evitadas com a utilização da enzima.