COMPARAÇÃO DA EFICIÊNCIA DE FIXADORES DE PROTOZOÁRIOS, UTILIZADOS EM ESTUDOS ECOLÓGICOS DE AMBIENTES AQUÁTICOS, EM FUNÇÃO DO PH DAS AMOSTRAS 

Henrique Cezar Alves (UFSCar); Mirna Helena Regali Seleghim (UFSCar); Luciana Hitomi Hayashi (UFSCar); Bruna Germano Bueno (UFSCar); Karina Ferreira Hisatugo (UFSCar); Mayara Pierozzi (UFSCar)

Protozoários são organismos eucarióticos reconhecidos como importantes componentes de ecossistemas aquáticos. São relativamente pequenos, frequentemente possuem grande mobilidade e, por não terem parede celular, possuem grande plasticidade e são sensíveis à manipulação (p. ex. filtração), características que dificultam a identificação e contagem em estudos ecológicos. Além disso, nestes estudos, a analise imediata de amostras vivas nem sempre é possível, sendo uma alternativa a utilização de fixadores para a preservação das amostras. Na literatura vários fixadores são mencionados , mas não existe consenso quanto ao melhor. Sabendo que o pH das amostras pode alterar a eficiência da fixação, este estudo teve como objetivo testar "in vitro" a eficiência de alguns fixadores em diferentes pHs. Para isso, em cada perfuração de placas de cultivo de tecidos, foram inoculados 5 indivíduos da espécie Paramecium caudatum em 1 mL de uma suspensão da bactéria Enterobacter aerogenes em água mineral corrigida para diferentes pHs (3, 5, 7 9 e 11), em triplicatas. Essas culturas foram incubadas a 30^oC e após 72 horas foram retiradas e preservadas com diferentes fixadores (formaldeído, bouin, cloreto de mercúrio, lugol ácido e lugol alcalino/ formaldeído/ tiossulfato de sódio). Os ciliados foram contados em microscópio ótico Leica DM/LS no aumento de 40 X com o auxílio de câmara de Sedgewick-Rafter. Como controles foram feitos cultivos, no mesmo período, em condições idênticas às anteriormente citadas. Todo o conteúdo destes cultivos foi contado diretamente (microgotas) em microscópio Leica DM/LS no aumento de 40 X, sem fixação, após 24, 48 e 72 horas para avaliar isoladamente o efeito do pH na densidade e sobrevivência dos organismos. O fixador que, em média, preservou a maior quantidade de células no pH 5 foi o bouin, no pH 7 foi o lugol ácido e nos pHs 9 e 11 foi o cloreto de mercúrio. Nas contagens diretas, foi observado que os ciliados não sobreviveram ao pH 3. A maior média da densidade celular em 24 horas de cultivo foi obtida no pH 5, em 48 horas no pH 7 e em 72 horas no pH 11. Com exceção do pH 3, entre 0 e 48 horas houve aumento na densidade populacional de todos os cultivos, entretanto, entre 48 e 72 horas houve decréscimo no número médio de indivíduos cultivados nos pHs 5, 7 e 9, sendo que apenas nos cultivos do pH 11 a média populacional aumentou. APOIO: FAPESP