INFLUÊNCIA DO MEIO DE CULTURA E FORMA DE INCUBAÇÃO NO PRIMO ISOLAMENTO DE MYCOBACTERIUM BOVIS. RESULTADOS PARCIAIS.

Cássia Yumi Ikuta (USP); Flavia Morato (USP); Tatiana Almeida Valvassoura (USP); Fernando Ferreira (USP); Ricardo Augusto Dias (USP); Gisele Oliveira de Souza (USP); Zenaide Maria de Morais (USP); José Soares Ferreira Neto (USP)

O sucesso do primo isolamento de Mycobacterium bovis a partir de lesões em tecidos depende do meio de cultura e das condições de incubação. Para investigar esses fatores, amostras de lesões granulomatosas de bovinos foram descontaminadas com Cloreto de 1-Hexadecilpiridinio (HPC) a 1,5% e inoculadas em quatro meios de cultura: Stonebrink (ST), Löwenstein-Jensen com adição de piruvato de sódio (LP), Middlebrook 7H11 e Agar sangue tuberculose (B83). Para cada meio de cultura também foram testadas três formas de incubação: aerófila (A), microaerófila em atmosfera com 10% de CO₂ (CO₂) e microaerófila com tensão de CO₂ obtida pela queima do algodão hidrófobo e fechamento do tubo com rolha (R). Aos 30 dias de incubação, as colônias que apresentaram características morfológicas compatíveis com micobactérias foram examinadas através da coloração de Ziehl-Neelsen e, tratando-se de bacilo álcool-ácido resistente, tal fato foi considerado como sucesso de isolamento. As proporções de sucesso de isolamento foram comparadas pelo teste de duas proporções. Até o momento, foram analisadas 70 amostras, perfazendo 210 repetições para cada meio de cultura (A, CO₂ e R) e 280 repetições para cada condição de incubação (ST, LP, 7H11 e B83). Para os meios de cultura, os resultados acumulados mostraram as seguintes proporções de sucesso de isolamento: ST=14,3%; LP=9%; 7H11=5,7%; B83=22,9%. E para as condições de incubação: CO₂=21,1%; A=9,3%; R=8,6%. Estatisticamente, o meio B83 apresentou maior proporção de sucesso no isolamento que o ST (p=0,03), LP (p=0,0002) e 7H11 (p<0,0001). O meio ST apresentou melhores resultados que o 7H11 apenas (p=0,006). A incubação CO₂ apresntou melhores resultados , tanto em relação à incubação A (p=0,0002) quanto à incubação R (p=0,0001). Esses resultados parciais mostram que o melhor meio de cultura para o primo isolamento de M. bovis foi o Agar sangue tuberculosee que a incubação em atmosfera com 10% CO₂ aumenta a chance de isolar o agente. A suposta microaerofilia produzida pela queima do algodão com o subsequente fechamento do tubo com rolha parece não ter não ter efeito algum no aumento da proporção do primo isolamento do M. bovis.