PRODUÇÃO DE UMA CITOTOXINA EXTRACELULAR POR CEPAS DE PROTEUS SPP. ISOLADAS DE PACIENTES COM INFECÇÃO DO TRATO URINÁRIO

Silvia Emanoele Cestari (UEL); Jacinta Sanchez Pelayo (UEL); Marcus Vinicius Stuqui Mastine (UEL); Rafael Osti de Melo (UEL); Halha Ostrenski Saridakis (UEL); Fernando Henrique Martins (UEL); Marilucia Santos Ludovico (UEL)

Proteus spp. são bactérias móveis pertencentes à família Enterobacteriaceae, capazes de sofrer uma mudança morfológica chamada de “swarming”, que as tornam alongadas e hiperflageladas. Estes microrganismos estão associados a ITU principalmente em indivíduos com alguma anormalidade do trato urinário ou relacionado com cateterismo vesical. Entre os fatores de virulência apresentados por Proteus spp. podemos citar como mais estudados a adesão, invasão em células, produção de urease, produção de enzimas proteolíticas e produção de hemolisinas. As hemolisinas produzidas por Proteus spp. são toxinas formadoras de poros que se inserem em alvos na membrana de células eucariontes, causando efluxo de sódio e estão associadas com a citotoxicidade em células Vero. Proteus spp. também produz toxina ligada à célula e no sobrenadante, que causa efeito citotóxico em células de linhagens Daudi, Raji, T24 e U937. O objetivo deste trabalho foi verificar se as cepas que não apresentaram fator hemolítico no sobrenadante de cultivo eram capazes de causar efeito citotóxico em células Vero. O sobrenadante de 170 cepas de Proteus spp. isoladas de urina de pacientes com ITU do Hospital Universitário de Londrina e Ribeirão Preto, foram testadas para a produção de citotoxina e do fator hemolítico. As cepas foram cultivadas em meio BHIB tamponado em estufa com intensa agitação a 37ºC por 48 horas, centrifugadas a 12 mil rpm por 5 minutos, e filtradas em filtros de 0,22 μm. Os testes foram realizados em microplacas com 1% de hemácias lavadas de carneiro e em monocamada de células Vero em placas de 96 escavações. Das cepas de Proteus spp. testadas, 8,3% apresentaram o fator hemolítico no sobrenadante da cultura e 32% produziram uma citotoxina que causou alterações celulares e levaram a morte com destruição do tapete celular, sem produzir o fator hemolítico. Estes resultados sugerem que cepas de Proteus spp isoladas de urina de pacientes com ITU, produziram uma citotoxina que pode ser um potente fator de virulência produzido por esta bactéria.